MagExtractor -RNA-

• Q

  말초 혈액 림프구에서도 RT-PCR 할 수있는 수준의 RNA를 얻을 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  2mL의 전혈에서 분리한 말초혈 림프구에서 RT-PCR에 의해 p53 유전자의 증폭을 확인한 사례가 있습니다.

MagExtractor -Viral RNA-

• Q

  회수액 중에 미량의 자성 비드가 혼입되어도 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  RT-PCR 등의 해석에 사용하기 전에 한 번 가볍게 원심분리하여 상청을 사용하십시오.

MagExtractor -Viral RNA-

• Q

  샘플의 종류와 수율의 기준을 알려주십시오. 열기 닫기

  A

  대응 샘플은 혈청, 혈장입니다.

  수율의 예는 다음과 같습니다.

  ; 대응 샘플	수율
  혈청 100μL	103copies HCV를 PCR로 감지

   

MagExtractor -PCR & Gel Clean up-

• Q

  잘 정화할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  MagExtractor -PCR & Gel Clean up- 문제해결
  
  문의 양식은 여기

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  ABI7500Fast의 경우 반응 용량 설정의 최대 값은 30μL이지만 어떻게해야합니까? 열기 닫기

  A

  취급 설명서대로 시약 조제를 실시하면 PCR 튜브에는 30μL 이상의 반응액이 들어가 있습니다만, 장치의 설정은 30μ L로 하고 반응을 하세요

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  검출에 사용할 수 있는 실시간 PCR 장치를 알려주세요. 열기 닫기

  A

  ■ Code No. NCV-101, NCV-102, NCV-301, NCV-302
  < br /><Roche> LightCycler^®96,  LightCycler^®480 Instrument II
  <ABI>7500Fast, StepOnePlus^®
  < Bio-Rad> CFX96 Touch Deep Well
  <TaKaRa>Thermal Cycler Dice III

  그 외, FAM 측정이 가능한 실시간 PCR 장치
  
  ■ Code No NCV-403
  
  <Roche> LightCycler^®96,  LightCycler ^®480 Instrument II
  < ABI>7500Fast, QuantStudio 5
  < Bio-Rad> CFX96 Touch Deep Well
  <TaKaRa>Thermal Cycler Dice III ※Cy5 필터 탑재
  
  그 외, FAM, ROX, Cy5의 3 파장이 측정 가능한 실시간 PCR 장치

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  양성/음성 컨트롤은 전처리액과 혼합하지 않고 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  Code No. NCV-101, NCV-102, NCV-301, NCV-302
  
  양성 컨트롤이나 음성 컨트롤도 시료 와 마찬가지로 전처리액과 혼합하여 RT-PCR 반응에 사용해 주십시오. 전처리액을 RT-PCR 반응액에 첨가하지 않으면 증폭성이 저하된다.
  
  Code No. NCV-403
  
  양성/음성 대조군은 전처리액과 혼합할 필요가 없습니다.

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  바이러스 불활성화액을 함유한 시료 채취 용기를 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  비활성화 성분보다 PCR을 저해할 수 있습니다.
  사용하는 검체 채취 용기에 포함된 용액을 첨가한 반응액에 대해, 양성 컨트롤 RNA의 스파이크 시험을 실시해, 검출 감도를 사전에 확인해 주세요.

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  NCV-301과 NCV-302는 무엇이 다른가요? 열기 닫기

  A

  NCV-301과 NCV-302는 프라이머 프로브의 배열이 다릅니다.
  미국 질병 예방 관리 센터(CDC) 발행 「2019-Novel Coronavirus (2019-nCoV) Real-time rRT-PCR Panel Primers and Probes」(Effective: 24 Jan 2020)에 기재되어 있는, N1 세트[ Code:NCV-301], N2 세트 [Code:NCV-302]입니다.
  
  

SARS-CoV-2 Detection Kit (-Multi-)

• Q

  양성 컨트롤이 들어 있습니까? 열기 닫기

  A

  제품에는 포함되어 있지 않으므로 별도 구입을 부탁드립니다.
  
  [Code No. NCV-101, NCV-102]에 대해서는 다음을 사용할 수 있습니다.
  
  · (주) 일본 유전자 연구소 신형 코로나 바이러스 양성 대조군 RNA http://ngrl.co.jp/topics/3294
  
  [Code No. NCV-301, NCV-302]에 관하여 는 다음을 사용할 수 있습니다.
  
  · BioRad & nbsp; "EDX SARS-CoV-2 Standard" [Code No. COV019]
  · (주) 일본 유전자 연구소 미국 CDC Real-time RT-PCR N1 / N2 PC mix [Code No. US-CDC-N1N2-PC] http://ngrl. co.kr/topics/3546
  
  [Code No. NCV-403]에 대해서는 다음을 사용할 수 있습니다.
  
  ·BioRad  “EDX SARS-CoV-2 Standard” [Code No. COV019]
  ·Vircell “AMPLIRUN SARS-CoV-2 RNA CONTROL” [Code No. MBC137-R]
  ·Thermo scientific “AcroMetrix Coronavirus 2019(COVID-19) RNA Control” [Code No. 954519]
  ·Twist Bioscience “Twist Synthetic SARS-CoV-2 RNA Control 1 [Code No. 102019]
  
  상기 이외의 제품과 포지콘의 조합의 경우는 검출되지 않거나 한쪽만 검출할 수 있습니다. 여기에 기재가 없는 포지콘을 사용하시는 경우는, 문의해 주세요.

TArget Clone

• Q

  Taq DNA 중합 효소, Tth DNA 중합 효소를 사용한 증폭 산물을 TA 복제 전에 저장할 수 있습니까?

  A

  3’-dA-overhangs는 불안정하기 때문에 PCR 후 즉시 사용하거나 냉동(-20℃) 저장하도록 하고 실온에서 방치하지 마십시오. 또, 동결 융해의 반복도 가능한 한 피해 주세요.

TArget Clone

• Q

  PCR 산물의 정제가 필요한가? 열기 닫기

  A

  다음과 같은 경우에는 정화가 필요합니다.
  · PCR 산물에 협잡물을 많이 포함하는 경우
  · PCR 산물에 프라이머 이량체를 많이 포함하는 경우 · PCR 산물에 비특이 반응에 기인하는 밴드를 포함하는 경우・KOD계 이외의 PCR 효소로 증폭한 산물에 dA를 부가하는 경우 사용한 버퍼, dNTP, (마그네슘)을 PCR시의 농도가 되도록 첨가하여 9μL로 하고, 10×A-attachment Mix를 1μL 첨가합니다.

TArget Clone

• Q

  TArget CloneTM [Code No.TAK-101]과 TArget CloneTM -Plus- [Code No.TAK-201]은 어떻게 구분할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  (TArget Clone^TM)
  일반적인 Taq계 PCR 효소(rTaq 또는 Blend Taq^® 등)이나 KOD Dash^®로 증폭하여 말단에 A가 부가된 PCR 산물의 TA 클로닝에 사용합니다.
  
  (TArget Clone^TM -Plus-)
  고정확도 PCR 효소 KOD DNA Polymerase, KOD -Plus- 시리즈 그리고 KOD FX 시리즈에서 증폭하여 말단에 A가 부가되지 않은 PCR 산물의 클로닝에 사용합니다.

KOD -Plus- Mutagenesis Kit

• Q

  PCR이 돌연변이를 포함하지 않습니까? 열기 닫기

  A

  정확성이 높은 KOD -Plus- 를 사용하고 있기 때문에 돌연변이가 들어갈 확률은 매우 낮습니다. 또한 PCR 사이클 수를 줄이는 프로토콜로 하고 있기 때문에 더욱 돌연변이가 들어갈 확률을 저감하고 있습니다. 폐사에서 키트의 컨트롤계로 제작한 변이체 24클론에 대해서, 2kb의 영역을 시퀀싱한 결과, 목적외의 변이는 48,000염기 중 1염기만이었습니다.

Blunting high

• Q

  Taq DNA Polymerase의 PCR 반응 용액을 그대로 평활화 반응에 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  PCR 반응액을 일부 취하고, Taq DNA Polymerase와 같은 Unit수의 KOD DNA Plolymerase를 첨가하여 72℃·2min. 처리합니다. 10×Blunting Buffer의 추가는 필요하지 않습니다.

제한 효소

• Q

  적절한 반응 조건에서 수행해도 절단할 수 없습니다. 열기 닫기

  A

  대장균에서 제조한 DNA의 경우 원인 중 하나로서 메틸화의 영향 생각할 수 있습니다. 여기 표에서 절단 억제를 받을 수 있는 효소 및 서열을 확인하세요.
  
  제한효소 사이트를 도입한 프라이머를 이용한 PCR 산물의 경우, 인식 서열의 5'측에 몇 염기나 여분에 부가하지 않으면 절단되기 어렵다고 합니다. 제한 효소에 따라 필요한 염기 수가 다르므로 문의하세요.
  
  상기와 함께 각 제품의 주의사항을 읽어 주십시오.

제한 효소

• Q

  메틸화의 영향은 무엇을 말합니까? 열기 닫기

  A

  제한 효소의 인식 부위에 메틸화된 염기를 포함하기 때문에 절단이 억제되는 것을 가리킨다.
  일반적인 대장균에서 DNA를 증가시켰을 때, 대장균이 보유하는 dam, dcm Methylase는 특정 염기 서열을 메틸화시킨다. 또한 포유류와 식물 유래의 DNA도 메틸화된 염기를 포함하고 있습니다.
  메틸화에 의해 절단 저해를 받는 제한 효소와 염기 서열은 여기
  
  dam , dcm Methylase의 영향은 이러한 Methylase의 결핍 균주에서 플라스미드를 제조함으로써 피할 수 있습니다. 또한 PCR 산물은 메틸화되지 않으므로 영향을 고려할 필요가 없습니다.

변형 효소

• Q

  【T4 DNA Polymerase】 pH가 8~9 이외의 버퍼에 용해되어 있는 DNA 샘플은 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  본 효소의 최적 pH는 8~9이며, pH 7.5 및 pH 9.7에서는 활성은 약 1/2이므로 에탄올 침전 또는 MagExtractor -PCR & Gel Clean up- [Code No. NPK-601 ]와 같은 DNA 반응액 정제용 키트 등으로 버퍼 치환을 실시하는 것을 추천합니다.
   

변형 효소

• Q

  【Calf Intestine Alkaline Phosphatase】 어떤 처리로 실활할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  본 효소는 65℃, 30min.의 가열 처리에 의해 거의 실활합니다만, 완전을 기하는 경우 에 페놀 처리를 실시하거나 MagExtractor -PCR & Gel Clean up- [Code No.NPK-601] 등의 DNA 반응액 정제용 키트로의 처리를 추천합니다.

변형 효소

• Q

  【E.coli Alikaline Phosphatase】실활 조건은?열린다 닫는다

  A

  본 효소는 내열성이 높기 때문에, 가열 처리에서는 불활성이 아닙니다. 페놀 처리를 수행하거나 MagExtractor -PCR & Gel Clean up- [< font color="#0066cc">Code No.NPK-601]와 같은 키트로 정제하여 효소를 제거해야 합니다.

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  잘 증폭할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  KOD One^®PCR Master Mix/-Blue- 문제해결
  
  문의 양식은 여기
  가능한 범위에서 괜찮으니, 아래의 정보를 알려주시면 감사하겠습니다. 입니다.
  · 제품의 Lot No. 액 조성 (액량, 농도)
  · PCR 사이클
  · 사이클러 기기명

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  PCR産物のTAクローニングは可能ですか?開く 閉じる

  A

  本酵素のPCR産物は平滑化されているため、直接TAクローニングすることはできません。
  クローニングには、KODシリーズ専用TAクローニングキット「TArget Clone^TM -Plus-[Code No. TAK-201] 」をお薦めいたします。このキットを用いると精製なしでPCR産物を高効率でTAクローニングすることができます。

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  KOD One PCR Master Mix -Blue- [Code No. KMM-201]의 PCR 산물을 시퀀싱에 사용하는 경우 염료 (브로 모 페놀)를 제외해야합니까? 열기 닫기

  A

  PCR 산물이 충분하면 염료가 들어있는 상태에서 시퀀싱에 사용할 수 있습니다.
  30 사이클에서 PCR 산물량이 적은 경우 35~40 사이클로 변경하여 PCR 산물량을 늘리십시오.

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  増幅産物の精製はどのような方法で行えば良いですか?開く 閉じる

  A

  フェノール/クロロホルム処理を行った後、エタノール沈殿を行うか、弊社の磁性ビーズを利用したDNA精製キット「MagExtractor ^TM -PCR & Gel Clean up-[Code No. NPK-601]」を利用すると便利です。

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  PCR 조건에 초기 변성 단계가 없지만 핫 스타트가 가능합니까? 열기 닫기

  A

  핫스타트 지원입니다. (KOD One에서는 핫 스타트용 항체의 실활에 초기 변성의 스텝은 불필요합니다.)

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  PCR 사이클이 끝난 후 68-72 ° C 7-10 분 연장 단계가 필요합니까? 열기 닫기

  A

  필요하지 않습니다.

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  프라이머의 Tm 값을 어떻게 계산할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  최근 접염기 대법(Nearest Neighbor method)을 이용하고 있습니다. 프라이머의 Tm 값 계산표(EXCEL)는 여기에서 다운로드할 수 있습니다.

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  신장 속도는 얼마나 빠릅니까? 열기 닫기

  A

  증폭 길이 ~1kb:1sec., 1~10kb:5sec./kb, 10kb~:10sec./kb입니다.
  
  신장 시간을 짧게 설정할 수 있으므로 PCR 반응이 끝나기까지 걸리는 시간을 단축할 수 있습니다.
  Applied Biosystems ^® 9700에서 PCR을 수행하는 경우 5kb의 표적 증폭에 필요한 시간은 30sec./kb 시약을 사용한 경우의 절반 정도로 단축할 수 있습니다.  (장치에 따라 PCR 소요 시간이 달라짐)

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  Dye 함유/불함유의 사용 구분이나 성능 차이를 가르쳐 주세요. 열기 닫기

  A

  Dye 포함:KOD One PCR Master Mix -Blue- [Code No. KMM-201] 및   Dye 없음:KOD One PCR Master Mix [Code No. KMM-101] 의 2 종류의 제품을 준비하고 있습니다만, Dye 함유의 차이만으로 , PCR 효소로서의 성능 차이는 없습니다.
  
  예를 들면 다음과 같은 PCR 후에 그대로 전기영동하는 것이 아닌 경우나, PCR 산물에 Dye가 포함되지 않는 편이 좋은 경우에는 Dye 없음:KOD One PCR Master Mix [ 코드 번호 KMM-101]을 사용하세요.

  • 인버스 PCR 후 제한 효소 DpnI [Code No. DPN-101]로 처리하는 변이 도입
  • PCR 산물의 3’ 말단에 A를 붙여 TA 클로닝을 실시한다

KOD One PCR Master Mix (-Blue-)

• Q

  KOD One의 특징은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  다른 KOD 시리즈의 뛰어난 특징(고정확, 고효율, 높은 성공률, 클루드 내성)을 가지며 더욱 고속 PCR을 실시하는 것이 가능합니다. 이노신(dI) 우라실(dU)을 포함한 프라이머 템플릿에도 대응하고 있습니다.

  마스터 믹스이므로 반응액 준비도 간단합니다. KOD One PCR Master Mix -Blue-에는 Loading Dye(BPB)가 포함되어 있으며, 반응 종료 후 그대로 겔에 어플라이즈할 수 있습니다.

KOD -Plus- Neo

• Q

  PCR 제품의 TA 클로닝이 가능합니까? 열기 닫기

  A

  이 효소의 PCR 산물은 평활화되어 직접 TA 클로닝이 불가능합니다.
  클로닝에는 KOD 시리즈 전용 TA클로닝 키트 TArget Clone^TM -Plus-[Code No. TAK-201] "를 추천합니다. 이 키트를 사용하면 정제없이 PCR 산물을 고효율로 TA 클로닝 할 수 있습니다.

KOD -Plus- Neo

• Q

  증폭 산물을 정제하는 방법은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  페놀/클로로포름 처리를 실시한 후, 에탄올 침전을 실시하거나, 당사의 자성 비드를 이용한 DNA 정제 키트 「MagExtractor ^{TM -PCR & Gel Clean up-[Code No. NPK-601 ]”를 이용하면 편리합니다.}

KOD -Plus- Neo

• Q

  프라이머의 Tm 값을 어떻게 계산할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  최근 접염기 대법(Nearest Neighbor method)을 이용하고 있습니다. 프라이머의 Tm 값 계산표(EXCEL)는 여기에서 다운로드할 수 있습니다.

KOD -Plus- Neo

• Q

  PCR시의 신장 반응 시간의 기준을 가르쳐 주세요. 열기 닫기

  A

  30초/kb를 권장합니다.
  ※PCR 산물이 스미어 형태가 되는 경우는, 신장 반응 시간을 짧게 해 검토해 주세요.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  KOD -Plus-와 KOD -Plus- Ver.2의 차이점은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Plus- Ver.2는 고성능·고정확 PCR 효소:KOD -Plus-의 버퍼를 개량하는 것으로 릴라이어빌리티(PCR 성공 비율)을 향상시킨 효소입니다. 정확성은 KOD -Plus-와 거의 동일합니다. 그 때문에, 별매의 전용 Buffer [Code No.KOD-3B, 1mL]를 입수하는 것만으로, 현재 소지의 KOD -Plus-를 Ver.2로서 사용하실 수 있습니다. KOD -Plus-에서 KOD -Plus- Ver.2 로의 전환을 고려하는 경우에 유용합니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  KOD -Plus- Ver.2はどんな酵素ですか?開く 閉じる

  A

  KOD -Plus- Ver.2は、高性能・高正確PCR酵素:KOD -Plus-のバッファーを改良することでリライアビリティー(PCR成功率)を向上させた、高効率な高正確性PCR酵素です。正確性はKOD -Plus-とほぼ同等です。KOD -Plus-と同じく、専用のTAクローニングキット『TArget Clone^TM -Plus-』[Code No. TAK-201]を用いることで、高効率でTAクローニングを行うことができます。
  KOD-Plus-を用いる実験のコツを『私にもできた!ライフサイエンス実験シリーズ Vol.1及びVol.2』に まとめています。是非ご参照ください。

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  GC가 높은 주형을 효과적으로 증폭하려면 어떻게합니까? 열기 닫기

  A

  KOD DNA polymerase는 원래 GC 함량이 높은 유전자의 증폭을 위한 효소인 것으로 알려져 있다. 또한 PCR 반응액에 최종 농도 2~5%의 디메틸설폭사이드(DMSO)를 첨가함으로써 효율이 높아지는 것을 알 수 있다. DMSO의 첨가에 의해 정확성에 변화가 없는 것을 확인하고 있습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  Stepdown PCR을 고려하고 싶습니다. 예가 있습니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Plus- 를 사용한 예로서 다음과 같은 방법이 있습니다.
   

  94℃	;2min.
  98℃	10초.	5 사이클
  74℃	9min.
  98 ℃	10초.	5 사이클
  72℃	9min.
  98℃	10초.	5 사이클
  70℃	9min.
  98℃	10초.	25 cycles
  68℃	9min.
  68℃	7min.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  PCR의 신장 반응 온도는 얼마나 좋습니까? 열기 닫기

  A

  72℃보다 68℃가 더 나은 결과를 얻을 수 있는 것 같습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  RT-PCR을 할 때 어떤 점을 조심하면 좋습니까? 열기 닫기

  A

  RT 반응에 사용한 RNA가 많이 반응액에 도입되면 증폭 저해가 일어나기 쉬워지는 것 같습니다. RT반응액을 그대로 PCR반응에 반입하는 경우는 반입량을 반응액의 2% 이하로 하는 것을 추천합니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  다른 PCR 효소에 첨가 된 dNTP를 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  첨부된 dNTPs를 사용하세요.
  dNTPs에 따라 KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2의 성능을 발휘하지 못할 수 있습니다. KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2에는 검정을 클리어한 dNTPs가 첨부되어 있습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  PCR 사이클링 중 변성 온도는 최대 몇 ℃까지 가능합니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Plus- 및 KOD -Plus- Ver.2에 사용되고 있는 KOD DNA polymerase는 Taq DNA polymerase 등에 비해 높은 내열성을 나타내는 것 알고 있습니다. 변성 온도와 시간에 대해 검토한 결과, 98℃・30초 정도까지 양호한 결과를 얻을 수 있는 것을 알고 있습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  PCR 제품의 TA 클로닝이 가능합니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Plus- 및 KOD -Plus- Ver.2로 증폭된 DNA의 말단은 평활 말단이 되어 있고, PCR 산물을 그대로 TA 클로닝 할 수 없습니다. KOD-Plus- 및 KOD-Plus- Ver.2로 증폭된 PCR 산물의 TA 클로닝에는 전용 TA 클로닝 키트 "TArget Clone^TM-Plus-"[Code No. TAK-201< /a>]를 추천합니다.
  이 키트에는 항-KOD DNA polymerse 항체와 Taq DNA polymerase가 사용됩니다. 항-KOD 항체가 증폭 후 잔류하고 있는 KOD DNA polymerase의 3→5'엑소뉴클레아제 활성을 억제하면서, Taq DNA polymerase의 TdT 활성으로 DNA 말단에 dA를 부가합니다. 따라서이 키트를 사용하면 정제없이 KOD-Plus- 및 KOD-Plus-Ver.2의 PCR 산물을 고효율로 TA 클로닝 할 수 있습니다. KOD PCR 제품 클로닝 요령은 『나도 할 수 있었다! 라이프 사이언스 실험 시리즈 Vol.1 및 Vol.2』에서도 볼 수 있습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  증폭이 허용되지 않습니다. 어떻게 해야 합니까? 열기 닫기

  A

  다음 방법을 생각해 볼 수 있습니다.
  
  · 어닐링 온도를 5~10℃ 낮추어 검토한다.
  · 20mer 이하의 프라이머를 사용하는 경우, 21mer 이상의 프라이머를 검토한다.
  · 마그네슘량을 늘려 검토한다. · 디메틸 술폭 시드 (DMSO)를 최종 농도 2-5 %가되도록 첨가하여 검토한다.

  <샘플 조건>
  · 역전사 산물을 주형으로 사용하고 있는 경우, 반입량을 반응액의 2% 이하로 하여 검토한다 . 게놈 DNA를 주형으로 사용하고 있는 경우, 주형량을 줄여 검토한다(특히 식물 유래 게놈 DNA의 경우)
  ※ RNA의 반입에 의해 KOD DNA polymerase 활성이 저해를 받을 수 있습니다. RT 산물이나 게놈 DNA에 공존하는 RNA의 반입에 주의해 주세요.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  PCR시 신장 반응 시간의 기준을 가르쳐주세요 열기 닫기

  A

  1분/kb를 권장합니다.
  ※PCR 산물이 스미어 형태가 되는 경우는, 신장 반응 시간을 짧게 해 검토해 주세요.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  증폭할 수 있는 타겟 길이에 대한 정보를 알려주세요. 열기 닫기

  A

  조건에 따릅니다만, Genomic DNA;~12Kb, cDNA;~10Kb,λDNA·Plasmid DNA;~15Kb 정도까지의 실적이 있습니다 합니다. "KOD -Plus-를 이용한 다양한 Long PCR"이 실시예는 여기에서 확인할 수 있습니다.

KOD-Plus-/KOD-Plus- Ver.2

• Q

  KOD -Plus-는 어떤 효소입니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Plus-는 KOD DNA polymerase를 기반으로 개발된 고효율·고정확한 PCR용 효소입니다. Buffer의 최적화와 항-KOD DNA polymerase 항체에 의한 핫 스타트법의 채용에 의해, 종래 판매하고 있던 KOD DNA Polymerase[ ?product_detail_id=166" target="_blank">Code No. KOD-101]에 비해 PCR의 효율성과 정확성이 향상된 것이 특징입니다. 정확성은 Taq DNA polymerase의 약 80배이며 유전자 클로닝 등에 적합합니다. PCR 산물의 말단은 평활화되어 있지만, 전용의 TA 클로닝 키트 「TArget Clone^TM -Plus-」[Code No. TAK-201]를 사용하여 고효율로 TA 클로닝을 할 수 있습니다.
  KOD-Plus-를 사용한 실험 요령을 "나도 할 수 있었다! 생명 과학 실험 시리즈 Vol.1 및 Vol.2"에 정리 합니다. 꼭 참조하십시오.

KOD DNA Polymerase

• Q

  PCR産物のTAクローニングは可能ですか?開く 閉じる

  A

  KOD DNA Polymeraseで増幅されたDNAの末端は平滑末端になっていますので、PCR産物をそのままTAクローニングすることはできません。
  KOD DNA Polymeraseで増幅したPCR産物のTAクローニングには専用キット「TArget Clone^TM -Plus-」をお薦めします。

KOD DNA Polymerase

• Q

  PCR시 신장 반응 시간은 얼마나 설정해야합니까? 열기 닫기

  A

  KOD DNA Polymerase는 다른 DNA Polymerase에 비해 확장 효율이 훨씬 뛰어납니다.
  신장 시간은 30sec./kb가 기준이 됩니다.
  ※PCR 산물이 스미어가 되는 경우는, 신장 반응 시간을 짧게 해 주세요.

KOD FX Neo

• Q

  PCR 산물이 웰에 남아 버려 전기영동이 잘 되지 않습니다. 열기 닫기

  A

  마우스 테일 등 동물 조직을 직접 증폭한 경우, 아가로스 전기영동으로 DNA 단편이 웰에 포획되어 목적 위치에 영동되지 않을 수 있습니다. 다음 절차에 따라 Proteinase K 처리 후 영동하는 것이 좋습니다.
  
  1) PCR 산물 50μL에 20 mg/mL Proteinase K 10μL를 첨가하여 혼합합니다.
  * 특히 첨가 후의 정치는 불필요합니다만, 실온·5분 정도 정도까지 정치해 주셔도 문제 없습니다.
  2) 6×Loading Dye를 12μL 첨가하여 혼합합니다.
  3) 웰에 적당량을 로드하여 전기영동을 합니다.

KOD FX Neo

• Q

  PCR 제품의 TA 클로닝이 가능합니까? 열기 닫기

  A

  이 효소의 PCR 산물은 대부분 평활화되어 직접 TA 클로닝이 불가능합니다.
  클로닝에는 KOD 시리즈 전용 TA 클로닝 키트 "TArget Clone^TM -Plus-[Code No. TAK- 201] "를 추천합니다. 이 키트를 사용하면 정제없이 PCR 산물을 고효율로 TA 클로닝 할 수 있습니다.

KOD FX Neo

• Q

  증폭 산물을 정제하는 방법은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  페놀/클로로포름 처리 후 에탄올 침전을 실시하거나 자성 비드를 이용한 DNA 정제 키트 MagExtractor ^TM -PCR & Gel Clean up-[Code No. NPK-601]" 사용 그러면 편리합니다.

KOD FX Neo

• Q

  프라이머의 Tm 값을 어떻게 계산할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  최근 접염기 대법(Nearest Neighbor method)을 이용하고 있습니다. 프라이머의 Tm 값 계산표(EXCEL)는 여기에서 다운로드할 수 있습니다.

KOD FX

• Q

  잘 증폭할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  KOD FX 문제 해결
  
  문의 양식은 여기
  가능한 범위에서 괜찮기 때문에, 이하의 정보를 알려 주시면 다행입니다.
  · 제품의 Lot No. 액 조성 (액량, 농도)
  · PCR 사이클
  · 사이클러 기기명

• Q

  프라이머의 Tm 값을 계산하는 방법은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  최근 접염기 대법(Nearest Neighbor method)을 이용하고 있습니다. 프라이머의 Tm 값 계산표(EXCEL)는 여기에서 다운로드할 수 있습니다.

KOD FX

• Q

  크루드 샘플이란 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  클루드 샘플의 크루드는
  Crude=자연 상태로, 원시, 가공되지 않은 등을 의미합니다. 있습니다. KOD FX에서는 이러한 가공되지 않은 샘플(마우스 테일 라이세이트, 혈액 등)에서 샘플의 정제 없이 직접 PCR 증폭이 가능합니다.

KOD FX

• Q

  또한 PCR 효율을 향상시키고 싶습니다. . . 열기 닫기

  A

  GC 함량이 높은 타겟을 증폭하는 경우, DMSO를 최종 농도에서 5%가 되도록 첨가함으로써 PCR 효율이 개선됨 있습니다.

KOD FX

• Q

  KOD FXで増幅したPCR産物はTAクローニングができますか?開く 閉じる

  A

  本製品で増幅したPCR産物の末端形状は、blunt end(平滑末端)になっており、そのままでは、TAクローニングはできません。従って、PCR産物をクローニングする場合には、必要に応じてリン酸化を行った後、blunt endを利用したクローニングを行ってください。下記資料もご参照ください。
  また、TAクローニングを行いたい場合には、KODシリーズ用TAクローニングキット『TArget Clone^TM-Plus- Code No. TAK-201 』を用いることにより、簡便にTAクローニングを行うことができます。

KOD FX

• Q

  최대 길이까지 증폭 할 수 있습니까? 그리고 긴 사슬 타겟을 증폭하는 데 도움이 있습니까? 열기 닫기

  A

  λ DNA를 주형으로 40kb, 인간 게놈 DNA를 주형으로 24kb, cDNA를 주형으로 13.5kb의 증폭을 확인하고 있습니다. 또, KOD FX의 PCR 에러에 의한 미스 염기의 흡수 빈도(에러율)는 실제로 시퀀싱으로 해석한 144,535 염기 중 불과 19 염기였습니다. 이 오류율은 Taq DNA Polymerase 및 타사 LongPCR용 효소의 약 10배 우수한 값입니다.
  
  장쇄 타겟을 증폭할 때의 요령입니다만, 10 kb를 넘는 긴 타겟의 증폭에는, 통상보다 긴(27mer 이상)에 프라이머 을 설계하여 특이성을 높이는 것과 동시에 어닐링(및 신장 반응)을 비교적 높은 온도로 설정함으로써 보다 좋은 결과를 얻을 수 있습니다. 특히 스텝 다운 사이클에서 증폭이 효과적입니다. 또한 탈염 등급 등의 정제도가 낮은 프라이머를 사용하면 스미어나 비특이 증폭의 원인이 될 수 있으므로 카트리지 정제 또는 HPLC 정제 등급의 프라이머를 사용하는 것이 좋습니다. 당사에서 프라이머 등을 검토한 데이터도 있습니다. 도움이되면 다행입니다.
  
  [관련 기사]
  "KOD FX"를 이용한 long PCR에서의 Primer 정제 등급 및 사슬 길이의 영향 < /span>

KOD FX

• Q

  어떤 클루드 샘플에서 DNA 정제없이 직접 증폭 할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  이 제품을 사용하여 DNA 정제없이 직접 증폭 할 수있는 순수한 샘플은 다음과 같습니다.
  이름을 클릭하면 실시예 등의 자세한 내용을 볼 수 있습니다.
   

  1.  마우스 테일 라이세이트   2.  혈액(Whole Blood)   3.  배양 세포(세포 현탁액)   4.  효모(콜로니 다이렉트)   5.  식물(잎·쌀알) 라이세이트   6.  인간 모근 샘플   7.  해수 필터 여과 샘플(DGGE 방법 사용)   8.  트랜스 제닉 쥐 여과지 혈액

  또한 DNA 샘플 사용하는 경우에도, 증폭 곤란(GC 리치, Long Target 등)인 샘플의 증폭도 잘 하고 있습니다.
  PCR로 곤란한 경우는 꼭 이용을 검토해 주십시오.

KOD FX

• Q

  Proteinase Kを用いて調製したマウステールライセートからも直接PCRできますか?開く 閉じる

  A

  Proteinase KとSDSがPCR反応に悪影響を及ぼす恐れがありますのでProteinase KとSDSを用いて調製されたライセートを直接PCRに用いることお勧めおできません。ご使用の場合、精製が必要となりますのでご注意ください。ライセートから直接PCRされたい場合は当社実施例に掲載の『アルカリ溶解法』をお勧めしております。→詳細はこちらからご覧になれます。
  ただ、最近ユーザー様からの実施例で『ホームページを拝見すると、ProK、SDSを使用したサンプルは>精製が必要と書かれていましたが、既に加えて処理したテンプレートしかなかったので、そのままPCRを行いましたが問題なくPCRできました。』とのご意見もいただいておりますのでサンプルによっては問題のない場合もあるようです。ご参考まで。

KOD FX

• Q

  PCR 산물을 정제 없이 그대로 제한효소 처리할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  여러 가지 제한 효소(Xho I, EcoR V, Pst I, Sac I)에서는 PCR 산물 10 μL에 제한효소 1μL(약 10U)을 첨가하고, 37℃, 60분에서 효율적으로 절단 가능하다는 것 확인합니다. 다만, 처음으로 실시하는 경우는, 한 번 예비 검토하고 나서 실시되는 것을 추천합니다.

KOD FX

• Q

  KOD FX를 멀티플렉스 PCR에 적용하고 싶습니다. 요령이 있습니까? 열기 닫기

  A

  프라이머를 등몰로 첨가하면, 어느 한쪽의 증폭 산물이 너무 증폭되어 버리는 일이 있습니다. 이 경우 첨가하는 프라이머 양의 비율을 고려하십시오. 일반적으로는, 증폭이 나쁜 쪽의 타겟의 프라이머량을 1.5배 정도로 늘려, 사이클수를 적게 하는 방향으로 검토함으로써 양호한 결과를 얻을 수 있는 것 같습니다.

KOD FX

• Q

  PCR 프라이머를 디자인 할 때주의 사항이 있습니까? 열기 닫기

  A

  프라이머는 GC 함량에 편향이 없는 22~35mer 정도(Tm값>60℃)의 것을 사용해 주십시오. 또한 분자내 2차 구조나 프라이머 이량체의 형성이 일어나지 않도록 주의하여 설계해 주십시오. 장쇄 타겟을 증폭하는 Long PCR에서는 가능한 한 프라이머 설계 소프트웨어를 이용하여 25~35mer 정도로 Tm값이 65℃ 이상의 프라이머를 설계해 주십시오. 또한, 프라이머의 3’단 영역이 GC 리치가 되지 않도록 주의해 주십시오. 프라이머의 정제는 카트리지 정제 등급 이상이면 특히 증폭 결과에 영향을 미치지 않는 것 같습니다.

KOD FX

• Q

  2단계 PCR(98℃→68℃)을 권장하고 있습니다.

  A

  예, 먼저 이 두 단계의 사이클을 권장합니다.
  다음 경우
   

  ●프라이머의 Tm 값이 73 °C 미만 ● 2단계 사이클에서 증폭이 보이지 않는 경우

  
  는 어닐링 온도를 (Tm-5)℃로 하는 3단계를 권장합니다.
   

  [3 단계 사이클] 94℃ 2min.< br clear="all" />(98℃ 10sec.→Tm-5℃ 30sec.→68℃ 1min./kb)×25-40cycles

KOD FX

• Q

  KOD FX의 정확성은 어느 정도입니까? 열기 닫기

  A

  KOD FX의 PCR 에러에 의한 미스 염기의 흡수 빈도(에러율)는, 실제로 시퀀싱으로 해석한 144,535 염기 중, 불과 19 염기로 했다. 이 오류율은 Taq DNA Polymerase 및 타사 Long PCR용 효소의 약 10배 우수한 값입니다.

KOD FX

• Q

  KOD -Plus-는 어떻게 다른가요? 어떻게 사용해야합니까? 열기 닫기

  A

  "KOD FX"는 다양한 우수한 특성을 가진 PCR 효소 "KOD DNA Polymerase"를 기반으로 개발되었습니다. 고성능 PCR 시약입니다. 본 효소는 뛰어난 "증폭 성공률", "증폭 효율", "신장성"을 나타내며 폭넓은 PCR에서 확실히 PCR 산물을 얻을 수 있습니다. KOD-Plus-와 KOD-Plus-Ver.2가 KOD DNA polymerase의 높은 정확성에 주목하여 개발된 반면, 본 효소는 "증폭 성공률" , 「증폭 효율」, 「신장성」을 중시해 개발된 효소라고 할 수 있습니다. 특히 KOD FX의 우수한 "증폭 성공률"은 클루드 샘플을 주형에 사용하는 경우에도 발휘되며, 전혈이나 배양 세포 등을 직접 PCR 반응액에 첨가해도 충분합니다. 한 증폭이 얻어지는 것을 확인하고 있습니다. 종래, 샘플로부터 DNA를 일단 정제하고 나서 행하고 있던 것 같은 PCR 실험도, 「KOD FX」를 이용하는 것으로, 번잡한 DNA의 정제가 불필요하게 되거나, 간단한 샘플 전처리만으로 PCR 실험이 가능합니다.

KOD FX

• Q

  KOD FX의 가장 큰 특징은 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  높은 증폭 성공률(당사 No.1)입니다. 마우스 테일 라이세이트·전혈·세포 현탁액 등의 크루드 샘플이나 GC 리치 타겟 등 통상 증폭이 곤란한 샘플로부터도 높은 성공률로 증폭이 가능합니다. 광범위한 PCR에서 좋은 데이터를 얻을 수 없다면 한 번 시도해 볼 가치가 큽니다.

KOD -Multi & Epi-

• Q

  PCR 제품의 TA 클로닝이 가능합니까? 열기 닫기

  A

  KOD -Multi & TArget Clone -Plus-[Code No. TAK-201]"를 사용합니다. (키트 시약으로 PCR 산물의 3' 말단에 A를 붙여 부속 T 벡터에 라이게이션합니다.)

KOD -Multi & Epi-

• Q

  바이설파이트 PCR 프라이머는 어떻게 설계해야 합니까? 열기 닫기

  A

  바이설파이트 변환 후 메틸화되지 않은 시토신이 우라실로 변환되기 때문에 무료 온라인 도구인 MethPrimer(http://www.urogene.org/cgi-bin/methprimer/methprimer.cgi)와 같은 전용 설계 도구 를 사용하는 것이 좋습니다.

KOD -Multi & Epi-

• Q

  멀티플렉스 PCR을 수행하는 경우 얼마나 오래 증폭할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  인간 게놈 DNA를 주형으로 사용하면 약 10kb까지의 여러 대상을 안정적으로 증폭할 수 있습니다.

KOD -Multi & Epi-

• Q

  멀티플렉스 PCR 프라이머는 어떻게 설계해야합니까? 열기 닫기

  A

  1) 가능한 한 각 프라이머 쌍의 Tm 값 차이가 커지지 않도록 합니다.
  2) 프라이머 쌍 사이에 상보적인 서열을 형성하지 마십시오.
  3) 멀티플렉스 PCR에서 사용하기 전에 단일 플렉스 PCR에서 특이성과 증폭 효율을 확인합니다 (그 때 멀티플렉스 PCR 사이클에서 검토합니다).

KOD -Multi & Epi-

• Q

  2x PCR Buffer for KOD -Multi & Epi-에 포함된 Mg2+ 농도를 알려주세요. 열기 닫기

  A

  버퍼 중에 4.0 mM(반응액의 최종 농도는 2.0 mM)인 Mg₂⁺이 포함되어 있습니다.

Blend Taq/ Blend Taq -Pus-

• Q

  증폭 결과에 편차가 보이지만 어떻게하면 좋습니까? 열기 닫기

  A

  신장 시간을 늘리거나, 어닐링 온도를 낮추는 등의 검토를 실시해 주세요.
  또한 Blend Taq^® 을 사용하는 경우 Blend Taq^{® ;}-Plus-를 사용하는 것이 좋습니다.
  Blend Taq^®-Plus-에는 항-Taq DNA polymerase가 혼합되어 있으며, 핫 스타트법에 의해 더욱 특이성 높은 PCR을 할 수 있습니다.
  조건에 대해서는 여기를 참조하세요.

Blend Taq/ Blend Taq -Pus-

• Q

  식민지 직접 PCR에 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  가능합니다. 여기 예제를 참조하세요.

Blend Taq/ Blend Taq -Pus-

• Q

  PCR産物のTAクローニングは可能ですか?開く 閉じる

  A

  原理上平滑末端の産物も若干混ざりますが、Taq DNA polymerase とほぼ同等の効率でTAクローニングできることを確認しています。
  TAクローニングには高効率TAクローニングキット「TArget Clone^TM [Code No. TAK-101]」をお薦めします。

Blend Taq/ Blend Taq -Pus-

• Q

  사이클링 조건을 어떻게 설정하면 좋습니까? 열기 닫기

  A

  아래 조건을 권장합니다.
   

  < tr>

  단계< /strong>	타겟 길이			< strong> 사이클 수
  	< font size="1"> <1kb	1kb ~ 6kb	> ;6kb
  1 변성	94℃, 2분			1
  2 변성	94℃, 30초※1			30
  3 어닐링	프라이머 Tm 값 -5℃ (55~60℃), 30초		68℃, 1분/kb 타겟※2・3
  4 확장	72℃, 1분	72℃, 1분/kb PCR 타겟

  
  ※1:94℃ 25~30초 또는 98℃ 5~10초의 범위를 추천합니다.
  ※2:프라이머의 Tm값은 70℃ 이상이 되도록 설계 바랍니다.
  ※3:타겟 길이가 10kb를 넘는 경우, 0.3~0.4mM의 dNTP의 농도로 PCR을 실시해 주세요.

Blend Taq/ Blend Taq -Pus-

• Q

  Blend Taq와 Blend Taq -Plus-는 어떻게 구분할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  Blend Taq^® -Plus-에는 상온에서 Taq DNA polymerase의 활성을 억제하기 위해 항 Taq 항체가 혼합되어 있습니다. 이 항체는 샘플 준비 시 발생하는 부반응을 억제합니다. 이 항체는 1회의 PCR 사이클에서 불활성화되기 때문에 PCR 반응은 저해하지 않습니다(핫 스타트). 따라서, Blend Taq^® -Plus- 쪽이, 보다 특이성 높은 고성능의 증폭이 가능합니다.

Quick Taq HS DyeMix

• Q

  잘 증폭할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  Quick Taq^® HS DyeMix 문제 해결
  
  문의 양식은 여기
  가능한 범위에서 괜찮기 때문에, 다음 정보를 알려 주시면 감사하겠습니다.
  · 제품의 Lot No. 액 조성 (액량, 농도)
  · PCR 사이클
  · 사이클러 기기명

Quick Taq HS DyeMix

• Q

  PCR産物のTAクローニングは可能ですか?開く 閉じる

  A

  PCR産物の末端にAが付加されますので、そのままTAクローニングが可能です。TAクローニングには高効率TAクローニングキット「TArget Clone^TM [Code No. TAK-101]」をお薦めします。

Quick Taq HS DyeMix

• Q

  식민지 직접 PCR에 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  가능합니다. 아래의 예를 참조하십시오.
  https://lifescience.toyobo.co.jp/detail/detail. php?product_detail_id=160#d06

KOD 대시

• Q

  PCR産物のTAクローニングは可能ですか?開く 閉じる

  A

  平滑末端の産物も混ざっているため、Taq DNA Polymeraseの場合よりも効率は低下しますが、そのままPCR産物を使ってTAクローニング可能です。
  TAクローニングには高効率TAクローニングキット「TArget Clone^TM [Code No. TAK-101]」をお薦めします。

KOD 대시

• Q

  PCR시의 신장 반응 시간은 얼마나 설정하면 됩니까? 열기 닫기

  A

  KOD Dash는 다른 DNA Polymerase에 비해 신장 효율이 훨씬 뛰어납니다. 신장 시간은 30sec./kb가 기준이 됩니다. 높은 처리량 PCR을 향하는 효소입니다.  

KOD 대시

• Q

  KOD Dash를 이용해 콜로니 다이렉트 PCR을 실시하고 싶습니다만, 조건을 가르쳐 주세요. 열기 닫기

  A

  여기의 예를 참조하십시오.

Marker Gene Detection Kit

• Q

  반응 액량을 스케일 다운 할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  추천 액량(50 μL)보다 적은 액량으로 반응하면 멀티플렉스 PCR의 효율이 저하되거나 타겟간에 증폭에 편향이 생길 수 있습니다. 올바른 결과를 얻으려면 권장 액량으로 반응하십시오.

Marker Gene Detection Kit

• Q

  세포 현탁액을 샘플로 사용하는 경우 얼마나 많은 양이 필요합니까? 열기 닫기

  A

  필요에 따라 트립신 처리 등으로 세포를 회수하고, PBS(-) 등으로 1×10^4cells/μL 전후가 되도록 현탁하고 그대로 1 μL을 PCR 템플릿으로 사용합니다.

Marker Gene Detection Kit

• Q

  사용하는 효소는 무엇입니까? 열기 닫기

  A

  고효율·고성공률 PCR 효소 「KOD FX Neo」를 채용하고 있습니다.

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  잘 감지할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  KOD SYBR™ qPCR Mix 문제 해결
  
  문의 양식은 여기

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  어떤 기기에 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  블록 타입의 기기(Fast Mode에도 대응) 외에, 유리 모세관을 이용한 고속 사이클러에도 대응하고 있습니다.
  또, 50×ROX reference dye가 별도 첨부되어 있으므로, 패시브 레퍼런스를 필요로 하는 기기에서도 각 기기에 적절한 ROX 농도로
  사용이 가능합니다.
  
  자세한 내용은 각사 qPCR 장치에서 50×ROX 첨가량을 참조하십시오.

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  프라이머와 증폭 산물의 Tm 값을 어떻게 계산할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  최근 접염기 대법(Nearest Neighbor method)을 이용하고 있습니다. 프라이머의 Tm 값 계산표(EXCEL)는 여기에서 다운로드할 수 있습니다.
   

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  일반 PCR 용 프라이머를 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  KOD 시리즈 등을 이용한 일반적인 PCR에서 설계한 증폭 길이가 2kb까지의 특이성이 높은 프라이머는 기본적으로 그대로 사용 가능 입니다.

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  PCR 반응물에 생체 조직과 같은 순수한 샘플을 얼마나 첨가 할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  엔드포인트 검출에 있어서 이하의 샘플량(20μl 반응의 경우)을 첨가 가능합니다.

  전혈 1/10으로 희석하여 2μL 첨가
  손톱 쌀알 1/3 정도를 직접 첨가 구강 점막 면봉 등으로 채취 후, 200μL의 물로 현탁, 반응액에 5μL 첨가 배양 세포 ~10³ cells
  동물 조직 알칼리 열 추출 액의 상청을 0.5~2μL 첨가

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  용융 곡선으로 증폭 길이 다형성 분석이 가능합니까? 열기 닫기

  A

  2Kb 이하의 증폭 길이로, 증폭 산물 간의 Tm값의 차이가 3℃ 이상(기기에 따라서는 5℃ 이상) 있으면, 원 튜브 반응 에서 멀티플렉스 PCR이나 증폭 길이 다형 해석 등을 할 수 있습니다.

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  KOD SYBR™ qPCR Mix와 기존 제품(Taq 사용)에는 어떤 차이가 있습니까? 열기 닫기

  A

  KOD SYBR™ 편리성과 범용성을 높인 제품입니다. 다음과 같은 특성의 차이가 있습니다.

  【종래품과의 특성 비교】

  < tr>

  	기존 제품(Taq 사용)	KOD SYBR ™ qPCR Mix< /p>
  효소	Taq DNA Polymerase	KOD DNA Polymerase [exo(-) mutant]
  증폭 길이	70-300bp	70-2000bp
  GC 풍부한 타겟	증폭하기 어려움	증폭하기 쉬운
  억제제의 영향	접기 쉬운 (DNA 정제 필요)	받기 어려운 (크루드 샘플에서 직접 증폭 가능)

   

  < a href="https://lifescience.toyobo.co.jp/user_data/selection-02.php" target="_blank">여기에 각 제품의 특징의 일람표가 있으므로, 함께 봐 주세요.

KOD SYBR qPCR Mix

• Q

  냉장 보관할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  4℃에서 보관할 수도 있습니다. 3개월 정도는 품질에 문제가 생기지 않는 것을 확인하고 있습니다. KOD SYBR™ qPCR Mix에는 형광 색소가 함유되어 있으므로 보존 시에는 차광해 주십시오.

THUNDERBIRD Next Probe qPCR Mix

• Q

  잘 감지할 수 없는 경우의 원인과 대응 방법을 알려주세요. 열기 닫기

  A

  문제해결을 참조하고 문제가 해결되지 않으면 Google에 문의하세요.
  THUNDERBIRD ^® Next Porobe qPCR Mix 문제해결
  
  문의 양식은 여기

THUNDERBIRD Next Probe qPCR Mix

• Q

  어떤 기기에 사용할 수 있습니까? 열기 닫기

  A

  다음 기기에 해당합니다.

  < td> Eco-RealTime PCR System< td> MyGo Mini

  메이커	기종
  Applied Biosystems	7000, 7300, 7500, 7500Fast, 7900, StepOne, StepOnePlus, ViiA7, QuantStudio 1, QuantStudio 3, QuantStudio 5, QuantStudio 6&& Studio 12K
  Agilent Technologies	Mx3000P, Mx3005P, AriaMx
  Bio -Rad	CFX96 Touch, CFX96 Touch Deep Well, CFX96 Opus, CFX384, CFX Connect, MiniOpticon
  Illumina
  Qiagen	RotorGene
  Roche	LC2.0, LC96, LC480
  Thermo Fisher	PikoReal96
  Analytikjena	qTOWER3G
  IT-IS Life Science
  TaKaRa	DiceII, DiceIII, CronoSTAR

  
  기종별 프로토콜은 여기< /a>에 있습니다.
  
  기타 기기에 대해서는 문의해 주십시오.
  문의 양식은 여기< /font>