과제해결사례

생명과학기업 D사 바이오연구부

두려워했던 캐리오버 오염에 의한 위양성이 설마 자신의 실험실 내에서 발생… /n 이것으로 안심! 다시 반복하지 않기 위해 도입한 2개의 새로운 시약의 실력이란?

해결 포인트

캐리 오버 오염으로 인한 위양성 위험을 줄이는 첨가제를 발견하십시오!

캐리 오버 오염으로 인한 위양성 위험을 줄이는 첨가제를 발견하십시오!

다양한 관련 키워드를 사용하여 인터넷 검색을 실시하고 있던 A씨는, 「캐리오버 오염 대책」이라고 하는 키워드로 발견한, 동양 방의 「Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Heat-labile」에 눈을 떴습니다 했다.
「캐리오버 오염에 의한 위양성의 리스크를 저감할 수 있다고 쓰여졌기 때문에, 흥미를 가졌습니다. 정확히 캠페인중이었기 때문에, 우선 한번, 시험해 보기로 했습니다」(A씨)

그러나 "Uracil-DNA Glycosylase (UNG), Heat-labile"를 이용하기 위해서는 실시간 PCR 시약도 dUTP를 포함하는 것으로 바꿀 필요가 있음을 알았습니다. 이것은 기존 D사가 사용하고 있던 고속 실시간 PCR용 키트를 사용할 수 없습니다.
거기서 A씨는, 동양방의 담당자에게 문의해, 자신들이 직면하고 있는 과제에 대해 상담을 시도했습니다. 그러자 그 내용을 들은 동양방 담당자로부터 고속 실시간 PCR을 할 수 있고, UNG가 사용할 수 있는 실시간 PCR 키트인 「THUNDERBIRD ® Next SYBR ® qPCR Mix」가 좋다고 가르쳐 주었습니다.

"THUNDERBIRD ® Next SYBR ® qPCR Mix"는 반응 용액에 dTTP 대신 dUTP를 포함하기 때문에 열 불안정성 UNG로 처리하여 이전에 수행 한 PCR의 증폭 산물이 혼입되어도 분해되어 캐리 오버 오염 네이션에 의한 위양성의 리스크를 저감할 수 있는 것에 더해, 고속 PCR에도 대응하고 있었습니다.

A씨는 곧바로 키트를 구입해, 실제로 시험해 보았습니다. 캐리 오버 오염으로 인한 위양성의 위험을 줄이기 위해 UNG를 첨가하고 "THUNDERBIRD ® Next SYBR ® qPCR Mix"에서 실시간 PCR을 실시. 그러면 증폭 효율에 문제 없고, 종래와 같은 양호한 증폭 결과를 얻을 수 있었습니다.
이 결과에 A씨들은 대만족. 지금까지의 고생이 날아간 순간이었습니다. 검토 결과, 바이오연구부에서는 이 2개의 키트를 이용한 PCR을 실시하는 것이 결정되었습니다.

그 후, D사의 연구실내에서는 캐리오버 오염에 의한 위양성은 일어나고 있지 않습니다.

* SYBR ® 은 Thermo Fisher Scientific의 연구 시약의 상표입니다.

*THUNDERBIRD® 도요보 주식회사의 연구용 시약의 상표입니다.

이 과제를 해결한 솔루션

THUNDERBIRD® Next SYBR® qPCR Mix

기존 제품인 THUNDERBIRD ® qPCR Mix의 조성을 대폭 개선한 제품입니다. PCR 효율을 높이고 비특이 반응(프라이머 다이머 등의 발생)을 억제함으로써 폭넓은 정량 가능 영역(다이나믹 레인지)을 얻을 수 있습니다.

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