
E 대학 분자 생물학 연구실
발현량이 적은 RNA의 해석 정밀도를 어떻게든 높이고 싶지만, 상정 이상으로 어렵게… /n 증폭능이 없는 일반적인 시약에 비해 20배 이상의 cDNA의 조제가 가능? 고성능 cDNA 조제 키트의 내용이란?
배경
매일 다양한 유전자 발현 해석에 종사하는 E 대학의 분자 생물학 연구실에서는 검출의 난이도가 높은 유전자의 발현 해석을 적극적으로 실시함으로써 새로운 연구 성과를 얻는 데 성공하고 있습니다 했다. 그러나 발현량이 매우 적은 RNA에 관해서는 대처법이 없어, 검출할 수 없는 문제를 어떻게 해소하는가가 과제가 되고 있었다.
도전
시중에서 판매되는 cDNA 준비 키트는 높은 정확도를 가진 cDNA의 증폭 능력이 없습니다.
매일 다양한 유전자 발현 해석에 종사하는 E 대학의 분자 생물학 연구실에서는 검출의 난이도가 높은 유전자의 발현 해석을 적극적으로 실시함으로써 새로운 연구 성과를 얻는 데 성공하고 있습니다 했다. 그러나 발현량이 매우 적은 RNA에 관해서는 대처법이 없어, 검출할 수 없는 문제를 어떻게 해소하는가가 과제가 되고 있었다.
시판되는 cDNA 준비 키트에서는 정확도가 높은 cDNA의 증폭능이 있는 것이 없다.
분자 생물학 연구실에서는, 발현량이 적은 RNA의 발현 해석도 많이 실시하고 있었습니다. 그러나 RNA량이 적으면 실시간 PCR로 해석이 가능한 양의 cDNA를 얻기가 어려워집니다.
연구팀의 A씨는 당시 안고 있던 과제에 대해 다음과 같이 말합니다.
「RNA의 발현량이 적은 케이스가 많이 있어, 그것을 해석하려고 해도 정밀도가 떨어져 버리거나, 검출할 수 없는 것이 우리의 큰 과제였습니다」(A씨)
연구실에서는 시판되는 cDNA 합성 키트를 이용하는 것도 검토했습니다. 그러나 정밀도가 높은 cDNA의 증폭능이 있는 것이 좀처럼 발견되지 않았습니다.
"우리가 추가 연구의 성과를 추구하기 위해서는, 발현량이 적은 RNA에 관한 해석의 정밀도를, 어쨌든 향상시킬 필요가 있었습니다"(A씨)
연구팀의 멤버는 사방 팔방수를 다하고 있지만, 좀처럼 최적의 수단을 찾을 수 없었고, 머리를 안고 있을 뿐이었습니다.
과제 포인트
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01
· RNA량이 적으면 분석 가능한 양의 cDNA를 얻는 것이 어렵다.
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02
・시판의 cDNA 합성 키트에는, 정밀도가 높은 cDNA의 증폭능이 있는 것이 없었다
