잎·종자 등의 식물 조직이나 식물 배양 세포 등으로부터 고순도의 게놈 DNA를 추출하기 위한 키트입니다. 회수된 DNA는 PCR과 같은 효소 반응에 직접 사용할 수 있습니다.
본 키트는, 자성 실리카 비드에 파쇄 용액 중의 DNA를 흡착시켜 회수하는 방법을 원리로 하고 있어, 에탄올 침전 조작이 불필요합니다. 또한 고속 원심분리기로 원심분리 조작을 최소화하여 간편하게 추출할 수 있습니다. 본 키트는 자성 비드 분리용 스탠드를 사용하여 사용할 수 있습니다.

● 고효율

잎·종자 등의 조직이나 배양 세포 등의 식물 시료로부터, 고효율로 게놈 DNA를 추출할 수 있습니다. 타사 키트에 비해 소량의 샘플에서도 추출 가능합니다.

●간편・단시간

자성 실리카 비드에의 DNA의 흡착을 기본 원리로 하고 있어, 간편하게 단시간에 DNA를 추출 가능합니다.

●고순도의 DNA 정제가 가능

추출된 DNA는 RNA나 단백질, 다당류 등의 불순물을 거의 포함하지 않고, PCR 등의 효소 반응에 직접 사용할 수 있습니다.

1. 수율과 순도 검토

이 키트를 사용하여 담배 잎 5, 10, 30mg에서 게놈 DNA 추출을 수행했습니다. 1/20량을 전기영동하여 타사 매뉴얼 키트와의 수율을 비교한 결과, 타사 키트와 동등 이상의 수량이 얻어지고, 또한 RNA를 거의 포함하지 않는 순도가 높은 DNA를 추출할 수 있는 것을 알 수 있었다.

2. 추출 DNA의 PCR 예

본 키트를 이용하여 담배 잎에서 추출한 게놈 DNA를 주형으로 하여 다양한 타겟의 PCR 증폭을 실시했습니다. 증폭에는 주형으로 게놈 DNA를 100ng 사용하고 PCR 효소로 KOD Dash ^® 를 사용했습니다. 결과로부터, 본 키트에서 추출한 DNA는 엽록체 게놈, 핵 게놈 모두 타겟으로서 PCR이 가능하고, 장거리 PCR도 충분히 가능하다는 것을 알았습니다.

1) B. Vogelstein and D. Gillespie, Proc. Natl. Acad. Sci. USA , 76 : 615-619 (1979)
2) R. Boom et al., J. Clin. Microbiol. , 28 : 495-503(1990)