EvaGreen® 형광 염료를 이용한 인터컬레이션 분석 키트
노로바이러스 검출 키트 G1/G2 -융해 곡선 해석-
가격표
용도
● 노로바이러스 유전자의 검출
설명
노로 바이러스 검출 키트 G1 / G2 - 용융 곡선 분석 -은 급성 위장염을 일으키는 식중독의 원인으로 알려진 노로 바이러스를 검변 샘플에서 1 단계 RT-PCR 방법으로 증폭하고 EvaGreen ® 형광 염료를 사용한 용융 곡선 해석에 의해 검출하는 킷입니다. 우리의 고성능 역전사 효소 ReverTra Ace ® 와 rTaq DNA Polymerase를 결합하여 버퍼를 최적화하여 고효율 1 단계 RT-PCR을 실현했습니다. 2-step RT-PCR법과 동등한 감도를 유지하면서 단시간(약 2시간 30분)으로 작업을 종료할 수 있습니다.
※본제품은, 대량 조리 시설 위생 관리 매뉴얼(2017년 3월 24일 위식 제85호 별첨(최종 개정:2017년 6월 16일부 생식 발 0616 제1호)에 기재된 노로바이러스 검사 법에 대응하고 있습니다.
특징
● 핵산 추출 정제 불필요
당사 독자 기술로 핵산 추출 정제 불필요한 PCR을 실현했습니다. 검변 검체는 반응 저해 물질을 분해하는 성분을 포함한 전용의 현탁액 ※ 에 현탁합니다. 그 후, 원심분리 상청을 전용의 전처리액에 첨가하고, 85℃ 1분간의 가열 처리를 하는 것만으로 RT-PCR에 사용할 수 있습니다.
● 종래법과 동등한 감도로 검출 가능
50 복사/테스트까지 감지 가능합니다. 1-step RT-PCR에서도 종래법과 동등한 검출 감도를 실현했습니다.
● 간편
1-step RT-PCR법을 채용하고 있기 때문에, 역전사(RT) 반응 종료 후에 PCR 시약을 혼합하는 작업은 불필요합니다.
● 신속
터치다운 사이클의 채용에 의해, 높은 감도와 특이성을 유지하면서, 한층 더 해석 시간의 단축이 가능하게 되었습니다.
실시간 PCR 장치에 반응액을 세팅한 후 약 2시간 30분 안에 결과를 확인할 수 있으며, 당일 보고 검사의 접수 시간을 연장할 수 있습니다.
● 필요한 시약을 모두 첨부
이 제품에는 분석에 필요한 모든 시약이 포함되어 있습니다. 용융 곡선 분석에 사용되는 인터컬레이션 형광 염료 EvaGreen® 도 키트에 포함되어 있습니다.
원리
실시예
검출 한계 복사 수 검토
본 Kit를 이용하여, 표시의 카피수의 G1 또는 G2RNA를 음성 대변의 전처리액에 첨가한 경우의 검출 결과를 나타냅니다. 두 가지 유형의 RNA 모두 50개 사본을 감지합니다.
(참고) 노로 바이러스 유행 균주의 판정 및 감염원의 특정에 있어서의 당사 키트의 활용 예 - * - * -
(서열 분석을위한 샘플 준비) 이노신을 함유 한 프라이머를 이용한 1 단계 RT-PCR에 의한 노로 바이러스 유전자의 증폭
기타 실시예
제품 내용
현탁액 20mL×1개 전처리액 400μL×1개 반응액 3mL×1개 효소액 500μL×1개 프라이머액(G1/G2) 500μL×1개 EvaGreen ® 액체 500μL×1개
- 기본 반응 조건
반응액 조성 반응액 30 μL 효소액 5μL 프라이머액(G1/G2) 5μL EvaGreen ® 액체 5μL 전처리된 현탁액 5μL Total 50 μL 사이클 조건 Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well UNG 반응 20℃ 5min. 역전사 반응 42℃ 5min. 사전 변성 95℃ 5min. 변성
회의·신장95℃
56℃
60℃10 초.
30 초.
20 초.20cycles 변성
회의·신장95℃
54℃
60℃10 초.
30 초.
20 초.25cycles 변성 용융 곡선
분석95℃
68℃
88℃10 초.
30 초.0.5℃/
단계※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.
융해 곡선 데이터로부터 양성 또는 음성을 판정하는 소프트웨어를 준비하고 있습니다. 제품 구입 분에게 무료로 제공합니다. 자세한 내용은 도요 보 테크니컬 라인 에 문의하십시오.
- 비고
EvaGreen ® 은 Biotium, Inc.의 등록 상표입니다.
관련상품
제품 내용
현탁액 20mL×1개 전처리액 400μL×1개 반응액 3mL×1개 효소액 500μL×1개 프라이머액(G1/G2) 500μL×1개 EvaGreen ® 액체 500μL×1개
- 기본 반응 조건
반응액 조성 반응액 30 μL 효소액 5μL 프라이머액(G1/G2) 5μL EvaGreen ® 액체 5μL 전처리된 현탁액 5μL Total 50 μL 사이클 조건 Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well UNG 반응 20℃ 5min. 역전사 반응 42℃ 5min. 사전 변성 95℃ 5min. 변성
회의·신장95℃
56℃
60℃10 초.
30 초.
20 초.20cycles 변성
회의·신장95℃
54℃
60℃10 초.
30 초.
20 초.25cycles 변성 용융 곡선
분석95℃
68℃
88℃10 초.
30 초.0.5℃/
단계※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.
융해 곡선 데이터로부터 양성 또는 음성을 판정하는 소프트웨어를 준비하고 있습니다. 제품 구입 분에게 무료로 제공합니다. 자세한 내용은 도요 보 테크니컬 라인 에 문의하십시오.
- 비고
EvaGreen ® 은 Biotium, Inc.의 등록 상표입니다.
※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]