실시간 PCR법에 의한 노로바이러스 검출 키트, 시간 단축 타입
노로바이러스 검출 키트 G1/G2 -고속 프로브 검출 Quick Step-
가격표
용도
● 노로바이러스 유전자의 검출
설명
본 제품은 대변 검체로부터 노로바이러스 genogroup GI, GII 유전자를 RT-PCR법으로 검출하는 키트입니다. 샘플의 열처리가 불필요하기 때문에 작업 도중에 튜브를 개폐할 필요가 없습니다. 또한 역전사 반응에서 PCR까지 약 50분 내에 수행할 수 있습니다.
특징
●열처리 공정이 불필요 열처리가 불필요해져, 전처리 공정의 간편화, 시간 단축이 가능하게 되었습니다. 뚜껑을 열고 닫지 않으므로 크로스 오염 위험을 줄일 수 있습니다.
●RT-PCR·프로브에 의한 검출이 최단 39분으로 완료 반응 조성의 최적화에 의해, RT-PCR의 고속화를 실현했습니다. 검변 검체를 전처리 후, 39분~1시간 정도로 반응 ・ 검출이 완료됩니다. 기존 제품보다 전처리 시간 · 반응 시간이 짧아지고 보고까지의 시간을 단축할 수 있습니다.
※반응 시간은 실시간 PCR 장치에 따라 다릅니다. 최소 39분은 Roche LightCycler 96 ® 의 반응 시간입니다.
● 시약 조제는 실온에서 가능 전처리, 시약의 조제는 모두 실온에서 가능하므로, 아이스 블록이나 얼음의 준비가 불필요하고, 서리의 부착을 신경쓸 필요가 없습니다.
●안심. UNG 처리에서 캐리오버 위험을 줄이기 위양성 의 원인으로 캐리오버 오염이 있습니다. 본 제품은 오염된 PCR 증폭 산물을 분해할 수 있는 Uracil-DNA Glycosylase(UNG)를 포함하므로 오염된 PCR 증폭 산물을 분해하여 위양성의 위험을 줄일 수 있습니다.
●대량 조리시설 위생관리 매뉴얼에 기재된 노로바이러스 검사법에 대응
대량 조리 시설 위생 관리 매뉴얼(2009년 3월 24일 위식 제 85호 별첨 있습니다.
원리
실시예
1. 음성 대변의 전처리액에 스파이크한 합성 RNA의 검출
GI 또는 GII RNA를 0 복사에서 6,250 복사까지 스파이크하여 검출한 결과, 50 복사까지 모두 검출이 가능했습니다.
* 보라색 곡선이 GI, 주황색이 GII, 파란색은 IC의 증식을 나타냅니다.
2. 공동 감염 모델에서 스파이크 된 합성 RNA의 GI / GII 동시 검출
GI, GII RNA 중 하나를 1x10 5 카피, 다른 쪽을 50 카피에서 1 x 10 5 카피까지 스파이크 해 검출한 결과, 한쪽이 1 x 10 5 카피 존재해도 다른 쪽은 50 카피의 검출이 가능한 것을 확인합니다 했다.
(참고) 노로 바이러스 유행 균주의 판정 및 감염원의 특정에 있어서의 당사 키트의 활용 예 - * - * -
(서열 분석을위한 샘플 준비) 이노신을 함유 한 프라이머를 이용한 1 단계 RT-PCR에 의한 노로 바이러스 유전자의 증폭
기타 실시예
참고 문헌
1) K. Terauchi et al., Jpn. J. Food Microbiol. , 35 (4) : 193-198 (2018)
제품 내용
전처리액 330μL×1개 반응액 1,100μL × 3개 효소액 550μL×1개 프라이머액(G1/G2) 550μL×1개 프로브액(G1/G2) 550μL×1개
- 기본 반응 조건
전처리 전처리액 3μL
대변 검체 현탁액 1μL Total 4μL 반응액 조성 반응액 30 μL 효소액 5μL 프라이머액(G1/G2) 5μL 프로브액(G1/G2) 5μL 전처리된 현탁액 4μL Total 49 μL 사이클 조건 Roche LightCycler 96® 역전사 반응 42℃ 4min. 사전 변성 95℃ 10 초. 변성
회의·신장98℃
52℃1 초.
10 초.2cycles 변성
회의·신장95℃
52℃1 초.
10 초.8cycles 변성
회의·신장95℃
52℃1 초.
10 초.30cycles (검출) ※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.
증폭 곡선 데이터로부터 양성 또는 음성을 판정하는 소프트웨어를 준비하고 있습니다. 제품 구입 분에게 무료로 제공합니다. 자세한 내용은 도요 보 테크니컬 라인 에 문의하십시오.
관련상품
제품 내용
전처리액 330μL×1개 반응액 1,100μL × 3개 효소액 550μL×1개 프라이머액(G1/G2) 550μL×1개 프로브액(G1/G2) 550μL×1개
- 기본 반응 조건
전처리 전처리액 3μL
대변 검체 현탁액 1μL Total 4μL 반응액 조성 반응액 30 μL 효소액 5μL 프라이머액(G1/G2) 5μL 프로브액(G1/G2) 5μL 전처리된 현탁액 4μL Total 49 μL 사이클 조건 Roche LightCycler 96® 역전사 반응 42℃ 4min. 사전 변성 95℃ 10 초. 변성
회의·신장98℃
52℃1 초.
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회의·신장95℃
52℃1 초.
10 초.8cycles 변성
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52℃1 초.
10 초.30cycles (검출) ※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.
증폭 곡선 데이터로부터 양성 또는 음성을 판정하는 소프트웨어를 준비하고 있습니다. 제품 구입 분에게 무료로 제공합니다. 자세한 내용은 도요 보 테크니컬 라인 에 문의하십시오.
※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]