노로 바이러스 검출 키트 G1 / G2 - 닦아 -

가격표

용도

● 후키토리 검체로부터 노로바이러스 유전자의 검출

설명

본 제품은 노로바이러스의 닦아내기 검사용 시약입니다. 바닥이나 문 손잡이, 화장실의 변좌 등을 닦아내기 검사용 면봉으로 닦아내기(이하, 닦아 검체라고 한다), 닦아 검체에 포함되는 노로바이러스를 농축해, 간편한 전처리 후, 리얼타임 RT-PCR법으로 검출하는 키트입니다.
다양한 실시간 PCR 장치에 대응하기 위해 GI/GII의 식별이 가능한 3색 프로브 키트 외에도 2파장에서 노로바이러스 검출이 가능한 2색 프로브 키트 * 를 준비하고 있습니다.
*2색 프로브 키트는 GI/GII의 식별은 할 수 없습니다.

특징

전처리는, 닦아 검체의 원심 후, 침전물의 열처리만 닦아 검체에 농축액을 첨가해, 냉각 고속 원심 분리를 실시하는 것으로, 신속하게 노로바이러스를 농축할 수 있습니다. RNA 추출은 1분의 열처리만으로 가능합니다.


검출은, 1-step 실시간 RT-PCR로 가능 역전사 반응으로부터 PCR 반응까지를 1-step으로 실시하기 때문에, 반응 도중에 시약을 첨가할 필요는 없습니다.

3색 프로브 [Code No FIW-101]에서는 GI/GII의 타이핑이 가능 노로바이러스 검출 키트 G1/G2 - 닦아 - [Code No FIW-101]에서는 GI 유전자를 Cy5 채널, GII 유전자를 ROX 채널로 검출하므로 GI/GII 타이핑이 가능합니다.

주) 노로바이러스 검출 키트 G1/G2 - 닦아 - [Code No FIW-201]는 노로바이러스 GI.GII의 검출이 가능합니다만, GI/GII를 식별할 수 없습니다.

종래의 PEG 침전법과 비교하여, 작업 시간·반응 시간이 단축 작업 시간(농축·열처리)은 약 15~30분, 리얼타임 RT-PCR의 반응 시간은 최단 45분으로, 닦아 검체로부터 노로바이러스의 검출 가능합니다.


노로바이러스 검출 키트
G1/G2-닦아내기-
농축·열처리
약 15~30분
실시간 RT-PCR (프로브 검출)
약 45분(원튜브 반응)

※반응 시간은 실시간 PCR 장치에 따라 다릅니다.

UNG 처리에서 캐리오버의 위험이 감소 위양성의 발생 원인으로 캐리오버 오염이 있습니다. 이 제품은 오염 된 PCR 증폭 산물을 분해 할 수있는 Uracil-DNA Glycosylase (UNG)를 포함하므로 오염 된 PCR 증폭 산물을 분해하여 위양성 위험을 줄일 수 있습니다.

다양한 실시간 PCR 장치에 대응 노로 바이러스 검출 키트 G1/G2 - 닦아내기-<3색 프로브> [Code No. FIW-101]
- FAM, ROX, Cy5가 동시에 검출 가능한 실시간 PCR 장치에 대응
(장치 예)


Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well 실시간 PCR 분석 시스템
Roche LightCycler ® 96 시스템
LightCycler ® 480 시스템
Applied Biosystems ® 7500Fast 실시간 PCR 시스템
TaKaRa Thermal Cycler Dice ® Real Time System III (Cy5 추가 탑재)
Thermal Cycler Dice ® Real Time System II (Cy5 추가 탑재)
Thermal Cycler Dice ® Real Time System Lite (Cy5 추가 탑재)

노로바이러스 검출 키트 G1/G2 - 닦아내기-<2색 프로브> [Code No. FIW-201]
- FAM·ROX, 혹은 FAM·HEX/VIC가 동시에 검출 가능한 실시간 PCR 장치에 대응
(장치 예)


Applied Biosystems ®

7900HT 실시간 PCR 시스템
StepOnePlusTM 실시간 PCR 시스템
TaKaRa Thermal Cycler Dice ® Real Time System III
Thermal Cycler Dice ® Real Time System II
Thermal Cycler Dice ® Real Time System Lite

원리

실시예

불활성화 노로바이러스를 이용한 닦아내기 시험

불활성화 GI 노로바이러스, 불활성화 GII
노로바이러스 1000, 100 카피를 플라스틱 배트에 적하한 후, 면봉으로 닦아내고 노로바이러스 검출 키트
G1/G2-닦아내기-<3색 프로브>
[Code No. FIW-101] 및 노로바이러스 검출 키트 G1/G2-닦아-<2색 프로브> [Code No. FIW-201]에서의 검출을 실시했습니다.

그 결과 GI, GII 모두 모두 검출되어 양성으로 판정되었습니다.

닦아내는 기구의 용액을 버리고 면봉으로 닦아내기
면봉을 짜내고 닦아낸 용액을 회수
닦아내는 시료 300μL와 농축액 300μL를 혼합
냉각 고속 원심 분리한다(4℃・15,000rpm・5분)
상등액 제거
전처리액 5μL를 첨가하고, 85℃·1분간의 열처리
1-step 실시간 RT-PCR로 증폭


[FIW-101]
사용 장치 : Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well 실시간 PCR 분석 시스템

※GI는 Cy5, GII는 ROX, 내부 표준(IC)은 FAM 채널로 측정합니다.
보라색의 증식 곡선이 GI, 오렌지색이 GII, 청색은 IC의 증식을 나타냅니다.


[FIW-201]
사용 장비 : Applied Biosystems ® StepOnePlus TM 실시간 PCR 시스템


※GI, GII는 FAM, 내부표준(IC)은 VIC 채널로 측정합니다.
녹색의 증식 곡선이 GI/GII, 청색은 IC의 증식을 나타냅니다.


(참고) 노로 바이러스 유행 균주의 판정 및 감염원의 특정에 있어서의 당사 키트의 활용 예 - * - * -


(서열 분석을위한 샘플 준비) 이노신을 함유 한 프라이머를 이용한 1 단계 RT-PCR에 의한 노로 바이러스 유전자의 증폭

기타 실시예

제품 내용

【FIW-101】


농축액 30mL×1개
전처리액 250μL×1개
반응액 750μL×2개
효소액 250μL×1개
프라이머액(G1/G2) 250μL×1개
프로브액(G1/G2) 250μL×1개
통제
DNA(G1/G2)
100μL×1개

【FIW-201】


농축액 30mL×1개
전처리액 250μL×1개
반응액 750μL×2개
효소액 250μL×1개
프라이머액(G1/G2) 250μL×1개
프로브액(G1/G2) 250μL×1개
HEX 프로브 유체 15μL×1개
통제
DNA(G1/G2)
100μL×1개
주의사항

취급 설명서에서 사용 가능한 닦아 기구(시판품)의 메이커, 제품을 확인해 주십시오.

기본 반응 조건

시판의 닦아 기구를 이용해, 검체를 채취, 회수 ↓
노로바이러스 농축 ↓
RNA 추출 ↓
RT-PCR


반응액 조성
반응액 30 μL
효소액 5μL
프라이머액(G1/G2) 5μL
프로브액(G1/G2) 5μL
열처리된 추출액 5μL
Total 50 μL

사이클 조건
Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well
역전사 반응 42℃ 4min.
사전 변성 95℃ 10 초.
변성
회의·신장
98℃
52℃
1 초.
10 초.
10cycles

변성
회의·신장

98℃
52℃
1 초.
10 초.
30cycles
(검출)

※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.

관련상품

제품 내용

【FIW-101】


농축액 30mL×1개
전처리액 250μL×1개
반응액 750μL×2개
효소액 250μL×1개
프라이머액(G1/G2) 250μL×1개
프로브액(G1/G2) 250μL×1개
통제
DNA(G1/G2)
100μL×1개

【FIW-201】


농축액 30mL×1개
전처리액 250μL×1개
반응액 750μL×2개
효소액 250μL×1개
프라이머액(G1/G2) 250μL×1개
프로브액(G1/G2) 250μL×1개
HEX 프로브 유체 15μL×1개
통제
DNA(G1/G2)
100μL×1개
주의사항

취급 설명서에서 사용 가능한 닦아 기구(시판품)의 메이커, 제품을 확인해 주십시오.

기본 반응 조건

시판의 닦아 기구를 이용해, 검체를 채취, 회수 ↓
노로바이러스 농축 ↓
RNA 추출 ↓
RT-PCR


반응액 조성
반응액 30 μL
효소액 5μL
프라이머액(G1/G2) 5μL
프로브액(G1/G2) 5μL
열처리된 추출액 5μL
Total 50 μL

사이클 조건
Bio-Rad CFX96 Touch TM Deep Well
역전사 반응 42℃ 4min.
사전 변성 95℃ 10 초.
변성
회의·신장
98℃
52℃
1 초.
10 초.
10cycles

변성
회의·신장

98℃
52℃
1 초.
10 초.
30cycles
(검출)

※ 상기 이외의 실시간 PCR 장치에서도 사용하실 수 있습니다.
장치에 따라 최적의 사이클 조건이 다르므로 자세한 내용은 동양방 기술 라인 에 문의하십시오.

※ 법규제에 대해서

독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]

독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]

위험소방법[위험물]

구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품

없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품

국가국민보호법[독소]

세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)

PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]

노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]