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T7 파지 유래 내열성 RNA 합성 효소

Thermo T7 RNA Polymerase [TRL-201]

가격표
용도
설명
특징
원리
실시예
관련 제품

가격표

RNA 합성 효소

품명	Code No.	포장	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※
품명 Thermo T7 RNA Polymerase TT7	Code No.TRL-201	포장 7,500U×1개	저장 온도 -20℃	설명서 사양	SDS	법규제 ※ 없음
품명 Thermo T7 RNA Polymerase TT7	Code No.TRL-201X5	포장 (7,500U×1개)×5	저장 온도 -20℃	설명서 사양	SDS	법규제 ※ 없음

RNA 합성 효소 (고농도 제품)

품명	Code No.	포장	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※
품명 Thermo T7 RNA Polymerase TT7	Code No.TRL-252	포장 50,000U×1개(고농도)	저장 온도 -20℃	설명서 사양	SDS	법규제 ※ 없음

용도
﻿● 고표지 RNA 프로브의 제작 ● RNA 스플라이싱 반응의 전구체의 제작 ● Cap analog를 프라이머로 한 Cap 구조를 가지는 mRNA의 제작 ● in vitro Translation용 mRNA의 제작
설명
Thermo T7 RNA Polymerase << TT7 >>는 유전자 공학적 기법에 의해 T7 phage 유래의 RNA Polymerase에 점 변이를 도입하여 내열성을 부여하고 있습니다.
 야생형 T7 RNA Polymerase에 대해서, 열안정성이 높고 50℃에서도 반응 가능하며, 또한 37℃에서도 비활성이 향상하고 있습니다.
특징
원리
실시예
1. 열 안정성 비교1. 열 안정성 비교"" /> 확대 +
 야생형 T7 RNA Polymerase를 48℃에서, Thermo T7 RNA Polymerase <>를 50℃에서 각 시간 인큐베이션하고, 잔류 활성을 비교하였다.
 그 결과, 야생형 T7 RNA Polymerase는 48℃에서 5min. 인큐베이션함으로써 활성은 약 1/10으로 저하되지만, Thermo T7 RNA Polymerase << TT7 >>는 50℃, 15min.의 인큐베이트에서도 거의 활성 하락은 보이지 않았다.

 50 ℃에서 반감기 야생형 T7 RNA Polymerase <1.9 min.
 Thermo T7 RNA Polymerase 84.5min
 2. 고온에서의 in vitro Transcription 반응2. 고온에서" in vitro Transcription反応" /> 확대 +
 야생형 T7 RNA Polymerase와 Thermo T7 RNA Polymerase << TT7 >>를 사용하여 각 온도에서 in vitro Transcription 활성을 비교했습니다.
 T7 프로모터를 포함한 플라스미드 0.5㎍을 주형으로, RNase Inhibitor를 20U와 양 효소를 각각 25U 첨가하고, 37~51℃의 각 온도에서 60min.반응시킨 후, 반응 산물의 전기영동을 실시했습니다.

 그 결과 Thermo T7 RNA Polymerase << TT7 >>는 51 ℃에서도 전사 반응을 수행 할 수 있음을 발견했습니다.
기타 실시예
참고 문헌
1)K. Ishikawa et al., Nucl. Acids Res. , 33 : e112(2005)
 2) M. Itoh et al., Nucl. Acids Res. , 30 : 5452-5464(2002)
 3)M. Chamberlin and J. Ring, J.Biol. Chem. , 248 : 2235(1973)
 4)M. Chamberlin and J. Ring, J.Biol. Chem. , 248 : 2245(1973)

제품 내용

Thermo T7 RNA Polymerase (50U/μL ^* ) 150μL
10×Buffer [TRL-2B] 1mL×2개
*TRL-252는 1,000U/μL의 고농도품입니다.

모양:
20mM KPO ₄ (pH7.7)
100mM NaCl
5mM DTT
0.1mM EDTA
0.01% Triton X-100
50% Glycerol

10×Buffer 〔Code No. TRL-2B〕 조성:
400mM Tris-HCl (pH8.0)
500mM NaCl
80mM _MgCl2
50mM DTT

활동 정의:
T7 DNA를 주형으로서 37℃, 1시간에 1nmole의 [ ³ H]-rNTP를 산불용성 침전물에 도입하는 효소량을 1U로 합니다.

기원:
E.coli 재조합체

순도:
본 효소 15U와 2μg의 ΦX174 DNA를 37℃에서 4시간 반응시켜도 DNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.

본 효소 25U와 λ/HindIII DNA 1㎍을 37℃, 16시간 반응시켜도 DNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.

본 효소 100U와 RNA 2㎍을 37℃, 4시간 반응시켜도 RNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.

기본 반응 조건: 멸균 증류수 XμL
10×버퍼 5μL
10mM rNTPs 2μL
RNase inhibitor 20U
주형 DNA 100~1000ng
Thermo T7 RNA Polymerase 25~100U
Total Volume 50μL
↓
37~50℃, 30~60min

English Page

관련상품

Thermo T7 RNA Polymerase [TRL-201] 부품 단품

품명	Code No.	포장	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※
품명 10×Reaction Buffer for Thermo T7 RNA Polymerase	Code No.TRL-2B	포장 1mL×1개	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※ -20℃

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품명	Code No.	포장	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※
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품명	Code No.	포장	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※
품명 RNase Inhibitor, recombinant	Code No.SIN-201	포장 2,500U×1개	저장 온도	설명서 사양	SDS	법규제 ※ -20℃

제품 내용

Thermo T7 RNA Polymerase (50U/μL ^* ) 150μL
10×Buffer [TRL-2B] 1mL×2개
*TRL-252는 1,000U/μL의 고농도품입니다.

모양:
20mM KPO ₄ (pH7.7)
100mM NaCl
5mM DTT
0.1mM EDTA
0.01% Triton X-100
50% Glycerol

10×Buffer 〔Code No. TRL-2B〕 조성:
400mM Tris-HCl (pH8.0)
500mM NaCl
80mM _MgCl2
50mM DTT

기본 반응 조건: 멸균 증류수 XμL
10×버퍼 5μL
10mM rNTPs 2μL
RNase inhibitor 20U
주형 DNA 100~1000ng
Thermo T7 RNA Polymerase 25~100U
Total Volume 50μL
↓
37~50℃, 30~60min

English Page

※ 법규제에 대해서

독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]

극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]

위험소방법[위험물]

신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품

없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품

국가국민보호법[독소]

세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)

PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]

노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]