E.coli Alkaline Phosphatase
E.coli Alkaline Phosphatase [BAP-111]
가격표
용도
● 클로닝 벡터의 self-ligation 방지
설명
본 효소는 분자량 80,000~90,000, 등전점(PI)=4.5, 최적 pH8.0이며, DNA 및 RNA의 인산 모노에스테르 결합을 가수분해하는 활성을 나타냅니다.
디인산에스테르 결합이나 트리인산 결합에는 작용하지 않지만, ATP 등의 피로인산 결합에는 가수분해 활성을 나타냅니다. 억제제로는 킬레이트제나 무기 인산이 알려져 있습니다.
본 효소는 라이게이션 반응에 DNA 단편의 5'말단의 인산기가 필요함을 이용하여 제한효소 처리한 벡터를 탈인산화 처리함으로써 셀프라이게이션의 방지 등에 이용됩니다.
또한, 5'말단 표지 프로브를 제작할 때 미리 프로브의 5'단의 인산기를 제거함으로써, Kinase와 [γ-32P]ATP를 이용한 표지의 효율 향상 등에도 사용됩니다 .
특징
● 높은 내열성
이 효소는 높은 내열성을 나타내며 평활 말단을 가지는 DNA 단편 등 고온에서의 장시간 처리에 적합합니다.
원리
실시예
기타 실시예
참고 문헌
1) TW Reid and IB Willson, The Enzymes(3rd Ed.) , 4 : 373
2) A. Gaven and C. Levinthal, Biochem. Biophys. Acta ., 38 : 470 (1960)
3) K. Yoda et al., Agric. Biol. Chem ., 44 : 1213(1980)
제품 내용
E.coli Alkaline Phosphatase (0.1-1U/μL)
10×Buffer[BAP-1R]모양:
50mM Tris-HCl (pH7.5)
50% Glycerol
10×Buffer [Code No. BAP-1R] 조성:
500mM Tris-HCl (pH8.0)
10mM MgCl2
활동 정의:
25℃, 1분에 1M Tris-HCl(pH8.0) 중에서 1μmole의 p-Nitorophenyl phosphate를 가수분해하는 효소량을 1U로 합니다.
기원:
E.coli K12 SW1033/pk 1-5
순도:
본 효소 1.875U와 1㎍의 λDNA/ Hin dⅢ분해물을 37℃에서 16시간 반응시켜도 DNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.
본 효소 1.875U와 2㎍의 tRNA를 37℃에서 16시간 반응시켜도 tRNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.
- 기본 반응 조건
멸균 증류수 XμL
DNA 0.5~2.5μg
10×버퍼 10μL
Alkaline Phosphatase 10 μL
Total Volume 100μL
↓
37℃, 60min.(5'돌출 말단)
60℃, 60min.(3'돌출, 평활 말단)
- 원포인트 조언
●반응 후의 샘플의 정제 본 효소는 내열성이 높고, 가열 처리에 의한 실활은 할 수 없습니다. 본 효소의 라이게이션 등에의 반입은, 대폭적인 효율 저하의 원인이 되기 때문에, 반응 후의 샘플은 페놀 처리를 실시하거나, 키트에 의한 정제가 필요합니다. 키트는 MagExtractor TM -PCR & Gel Clean up- 등을 권장합니다.
●Calf intestine Alkaline phosphatase와의 성질 비교
Calf intestine Alkaline phosphatase의 예를 참조하십시오.
관련상품
E.coli Alkaline Phosphatase[BAP-111]파트 단품 판매 종료 대체품 없음
품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
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품명 10×Reaction Buffer for BAP | Code No.BAP-1R | 포장 1mL×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ -20℃ |
제품 내용
E.coli Alkaline Phosphatase (0.1-1U/μL)
10×Buffer[BAP-1R]모양:
50mM Tris-HCl (pH7.5)
50% Glycerol
10×Buffer [Code No. BAP-1R] 조성:
500mM Tris-HCl (pH8.0)
10mM MgCl2
활동 정의:
25℃, 1분에 1M Tris-HCl(pH8.0) 중에서 1μmole의 p-Nitorophenyl phosphate를 가수분해하는 효소량을 1U로 합니다.
기원:
E.coli K12 SW1033/pk 1-5
순도:
본 효소 1.875U와 1㎍의 λDNA/ Hin dⅢ분해물을 37℃에서 16시간 반응시켜도 DNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.
본 효소 1.875U와 2㎍의 tRNA를 37℃에서 16시간 반응시켜도 tRNA의 전기영동 패턴은 변화하지 않습니다.
- 기본 반응 조건
멸균 증류수 XμL
DNA 0.5~2.5μg
10×버퍼 10μL
Alkaline Phosphatase 10 μL
Total Volume 100μL
↓
37℃, 60min.(5'돌출 말단)
60℃, 60min.(3'돌출, 평활 말단)
- 원포인트 조언
●반응 후의 샘플의 정제 본 효소는 내열성이 높고, 가열 처리에 의한 실활은 할 수 없습니다. 본 효소의 라이게이션 등에의 반입은, 대폭적인 효율 저하의 원인이 되기 때문에, 반응 후의 샘플은 페놀 처리를 실시하거나, 키트에 의한 정제가 필요합니다. 키트는 MagExtractor TM -PCR & Gel Clean up- 등을 권장합니다.
●Calf intestine Alkaline phosphatase와의 성질 비교
Calf intestine Alkaline phosphatase의 예를 참조하십시오.
※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]