Restriction enzyme [DPN-101]
Dpn I
가격표
용도
설명
(인식 배열) 본 효소는 인식 서열의 아데닌이 메틸화되어 있는 경우에만 절단 작용을 나타냅니다. 이 성질을 이용하여 부위 특이적 변이 도입을 할 때 주형 플라스미드의 소화에 사용할 수 있습니다.
Competent high JM109, DH5, DH5α [ Code No. DNA-900F, DNA-901F, DNA-903F ], Competent Quick DH5α [ Code No. DNA-913F ] 는 모두 dam + 이므로 이들로부터 추출한 플라스미드는 , GATC 서열의 아데닌은 메틸화되었습니다.
이 플라스미드를 주형으로 하여, 인버스 PCR법 등에 의해 부위 특이적 변이 도입을 실시해, 본 효소를 작용시켰을 경우, 변이가 들어간 플라스미드는 메틸화의 영향을 받지 않기 때문에, 변이 도입 전의 주형 플라스미드만 를 분해할 수 있습니다.
특징
원리
실시예
1. 각종 PCR buffer 중에서의 Dpn Ⅰ 활성
다양한 PCR buffer에서 Dpn Ⅰ 활성 Dpn Ⅰ에 첨부된 TA buffer와 비교했을 때, KOD#2, KOD Dash ® buffer 이외에는 80% 이상의 활성을 보였습니다. |
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2. 변이 도입 실험에 사용한 예
KOD -Plus-
실시 예 4 : inverse PCR에 의한 부위 특이 적 돌연변이 도입
KOD One
실시 예 6 : 상보적인 프라이머를 이용한 돌연변이 도입 (Site-Directed Mutagenesis)
실시 예 14 : 유전자 발현 벡터 간의 전환
기타 실시예
제품 내용
Dpn I ( 3-20U/μL )
TA Buffer [Code. TA-BUFF]
6x Loadying Dye [RE-DYE]모양
10mM Tris-HCl (pH7.4)
400mM NaCl
0.1mM EDTA
1mM DTT
200μg/mL BSA
50% Glycerol
기원
Diprococcus pnuemoniae G41
반응 온도
37℃
- 주의사항
・본 효소는 Adenine이 메틸화를 받고 있는 경우에만 절단 작용을 나타냅니다.
· 메틸화의 영향
・본 효소의 반응에는 BSA는 불필요하므로, 본 효소에 첨부된 TA Buffer에는 10x BSA는 첨부되어 있지 않습니다.
- 원포인트 조언
부위 특이적 변이 도입을 행하는 경우, KOD-Plus-, KOD-Plus-Neo, KOD FX, KOD FX Neo, KOD One 등의 KOD계 효소를 이용하여 PCR을 실시한 후의 반응액에 직접 본 제품 를 첨가하여 주형 플라스미드를 소화 할 수 있습니다.
FAQ는 이쪽 →
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제품 내용
Dpn I ( 3-20U/μL )
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6x Loadying Dye [RE-DYE]모양
10mM Tris-HCl (pH7.4)
400mM NaCl
0.1mM EDTA
1mM DTT
200μg/mL BSA
50% Glycerol
기원
Diprococcus pnuemoniae G41
반응 온도
37℃
- 주의사항
・본 효소는 Adenine이 메틸화를 받고 있는 경우에만 절단 작용을 나타냅니다.
· 메틸화의 영향
・본 효소의 반응에는 BSA는 불필요하므로, 본 효소에 첨부된 TA Buffer에는 10x BSA는 첨부되어 있지 않습니다.
- 원포인트 조언
부위 특이적 변이 도입을 행하는 경우, KOD-Plus-, KOD-Plus-Neo, KOD FX, KOD FX Neo, KOD One 등의 KOD계 효소를 이용하여 PCR을 실시한 후의 반응액에 직접 본 제품 를 첨가하여 주형 플라스미드를 소화 할 수 있습니다.
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※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]