HOMETA-cloning kit [High efficient]
TArget Clone™ / TArget Clone™ -Plus- [TAK-101, 201]
가격표
PCR 산물 TA 클로닝 키트
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 TArget Clone | Code No.TAK-101 | 포장 10회용 | 저장 온도 -20℃ | 설명서 사양
|
SDS
|
법규제 ※ 없음 |
PCR 산물 TA 클로닝 키트 (평활 말단용)
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 TArget Clone -Plus- | Code No.TAK-201 | 포장 10회용 | 저장 온도 -20℃ | 설명서 사양
|
SDS
|
법규제 ※ 없음 |
용도
● 통상의 TA 클로닝 「TArget Clone™」
●KOD 시리즈 유래의 평활 말단 산물의 TA 클로닝 「TArget Clone™ -Plus-」
●KOD 시리즈 유래의 평활 말단에의 dA 부가 「10×A-attachment Mix」 
설명
고효율 TA 클로닝 키트입니다. Taq계 효소로 증폭된 PCR 산물 이외에 KOD 시리즈로 증폭된 평활 말단 PCR 산물도 TA 클로닝이 가능합니다.
Taq나 Tth DNA polymerase, Blend Taq ® , KOD Dash 등의 증폭 산물은 3' 말단에 아데닌이 부가된 것이 많아, TArget Clone™ [Code No. TAK-101]을 이용하여 직접 T 벡터에 연결한다 수 있습니다.
한편, KOD계(KOD DNA Polymerase, KOD-Plus-, KOD FX, KOD One 등)의 PCR 산물의 3' 말단의 대부분은 평활화되어 있기 때문에, PCR 산물을 그대로 이용하여 TA 클로닝할 수 없습니다 . 따라서 TArget Clone™-Plus-[Code No. TAK-201]은 10×A-attachment Mix를 사용하여 평활 말단에 염기(주로 아데닌)를 부가하는 반응을 가함으로써 TA 클로닝을 가능하게 한다. 있습니다. 10×A-attachment Mix에는, 말단에 염기를 부가하기 위한 Taq DNA polymerase와 반응 후에 잔류하고 있는 KOD의 3'→5'Exonuclease 활성(교정 활성)을 중화하기 위한 항KOD 항체가 포함되어 있습니다.
10×A-attachment Mix[Code No. TAK-301]의 단품 판매도 있습니다.
특징
● 신속·고효율 라이게이션 반응은 최단 5분 만에 완료됩니다.
●확실
LacZ를 이용한 컬러 선택이 가능합니다.
●편리 멀티 클로닝 사이트의 양단에 전사용의 프로모터(T7, T3)를 가지고 있어, 전사 산물의 조제에 사용할 수 있습니다.
●평활 말단 PCR 산물에도 대응 「TArget Clone™ -Plus-」[TAK-201]
KOD, KOD -Plus-, KOD FX, KOD One 등의 PCR 산물을 사용하여 TA 클로닝을 할 수 있습니다. PCR 산물을 10×A-attachment Mix [Code No. TAK-301]와 혼합하고, 10분간 반응시키는 것만으로 dA 부가가 완료.
원리
실시예
다양한 PCR 산물을 이용한 TA 클로닝 효율 검토
고정밀 효소 : KOD-Plus-, KOD-Plus- Ver.2 및 Blend Taq ®를 사용하여 human genome에서 β-globin 유전자 0.5kb를 PCR 증폭했습니다. 그 후, PCR 제품을 정제 없이 TArget Clone™ 및 TArget Clone™ -Plus-를 사용하여 TA2 Vector에 TA 클로닝을 실시하였다. 그 결과, KOD -Plus- 및 KOD -Plus- Ver.2를 이용한 경우, TArget Clone™ -Plus-를 사용함으로써, 현격하게 클로닝 효율이 향상되는 것을 알 수 있었다. 한편 Blend Taq ® 에서는 TArget Clone ™ -Plus -와 비교하면 약간 효율은 저하하지만, TArget Clone ™을 사용해도 문제없이 고효율로 TA 클로닝 할 수 있음을 알았습니다.
기타 실시예
참고 문헌
1) H. Mizuguchi et al., J. Biochem . (Tokyo), 126 : 762-768 (1999)
제품 사용 문헌
1) F. Ge et al., Journal of Biochemistry , 143(5) : 603-609. (2008)
제품 내용
【TAK-101】
pTA2 Vector(50ng/μL)
2×Ligation Buffer
T4 DNA Ligase
【TAK-201】
pTA2 Vector(50ng/μL)
2×Ligation Buffer
T4 DNA Ligase
10×A-attachment Mix [TAK-301]
【TAK-301】
10×A-attachment Mix
10 μL
50 μL
10 μL
10 μL
50 μL
10 μL
10 μL
25μL (25회용)
- 기본 반응 조건
[TArget Clone™]
Distilled Water
2×Ligation Buffer
pTA2 Vector (50ng/μL)
PCR Product
T4 DNA Ligase
Total Volume
room temp.(15~25℃), 30min.
(3-X) μL
5μL
1μL
XμL
1μL
10 μL
[TArget Clone™ -Plus-]
PCR Product from KOD
10×A-attachment Mix
Total Volume
60℃, 10min.
↓
Distilled Water
2×Ligation Buffer
pTA2 Vector (50ng/μl)
dA-attached PCR products
T4 DNA Ligase
Total Volume
room temp.(15~25℃), 30min.
9μL
1μL
10 μL
(3-X) μL
5μL
1μL
XμL
1μL
10 μL
[10×A-attachment Mix]
PCR Product from KOD
10×A-attachment Mix
Total Volume
60℃, 10min.
↓
dA-attached PCR product
T-벡터
Ligation Reagent
room temp.(15~25℃), 30min.
9μL
1μL
10 μL
- 원포인트 조언
다음 경우에는 dA 부가 반응 전에 PCR 산물의 정제가 필요합니다.
・KOD시리즈로 증폭한 PCR 산물에 엑스트라 밴드가 발생하고 있는 경우.
・KOD 시리즈 이외의 프루 프리딩 활성을 가지는 효소로 증폭된 PCR 산물을 사용하는 경우.정제 PCR 산물에 dA 부가를 실시하는 경우는, A-attachment Mix에 첨가하고, dNTP, MgCl 2 , PCR Buffer를 1×농도가 되도록 첨가하여 반응합니다.
관련상품
평활 말단 PCR 산물에 dA 첨가
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 10×A-attachment Mix | Code No.TAK-301 | 포장 25μL(25회용) | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ -20℃ |
표준 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 rTaq DNA Polymerase Mg 별첨 타입 | Code No.TAP-201 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS
|
법규제 ※ -20℃ |
표준 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 rTaq DNA Polymerase Mg 함유 타입 | Code No.TAP-211 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS
|
법규제 ※ -20℃ |
역전사 활성 보유 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 rTth DNA Polymerase | Code No.TTH-301 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS
|
법규제 ※ -20℃ |
고성능 Taq DNA polymerase
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 Blend Taq | Code No.BTQ-101 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
|
SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고성능 Taq DNA polymerase
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 Blend Taq -Plus- | Code No.BTQ-201 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고효율 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD 대시 | Code No.LDP-101 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고정확도 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명KOD DNA Polymerase | Code No.KOD-101 | 포장 250U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고효율, 고정확도 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD -Plus- | Code No.KOD-201 | 포장 200U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고효율, 고정확도 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD -Plus- Ver.2 | Code No.KOD-211 | 포장 200U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고정확도, 고효율, 고속 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD -Plus- Neo | Code No.KOD-401 | 포장 200U×1개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
높은 성공률 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD FX | Code No.KFX-101 | 포장 200U×1개(200회용) | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고효율·고성공률 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD FX Neo | Code No.KFX-201 | 포장 200U×1개(200회용) | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
멀티플렉스 PCR·바이설파이트 처리 DNA용 <br>PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD -Multi & Epi- | Code No.KME-101 | 포장 200U×1개(200회용) | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
고속, 고정밀, 높은 성공률 PCR 마스터 믹스
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD One PCR Master Mix | Code No.KMM-101 | 포장 1mL×5개 | 저장 온도 | 설명서 사양
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SDS
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법규제 ※ -20℃ |
제품 내용
【TAK-101】
pTA2 Vector(50ng/μL)
2×Ligation Buffer
T4 DNA Ligase
【TAK-201】
pTA2 Vector(50ng/μL)
2×Ligation Buffer
T4 DNA Ligase
10×A-attachment Mix [TAK-301]
【TAK-301】
10×A-attachment Mix
10 μL
50 μL
10 μL
10 μL
50 μL
10 μL
10 μL
25μL (25회용)
- 기본 반응 조건
[TArget Clone™]
Distilled Water
2×Ligation Buffer
pTA2 Vector (50ng/μL)
PCR Product
T4 DNA Ligase
Total Volume
room temp.(15~25℃), 30min.
(3-X) μL
5μL
1μL
XμL
1μL
10 μL
[TArget Clone™ -Plus-]
PCR Product from KOD
10×A-attachment Mix
Total Volume
60℃, 10min.
↓
Distilled Water
2×Ligation Buffer
pTA2 Vector (50ng/μl)
dA-attached PCR products
T4 DNA Ligase
Total Volume
room temp.(15~25℃), 30min.
9μL
1μL
10 μL
(3-X) μL
5μL
1μL
XμL
1μL
10 μL
[10×A-attachment Mix]
PCR Product from KOD
10×A-attachment Mix
Total Volume
60℃, 10min.
↓
dA-attached PCR product
T-벡터
Ligation Reagent
room temp.(15~25℃), 30min.
9μL
1μL
10 μL
- 원포인트 조언
다음 경우에는 dA 부가 반응 전에 PCR 산물의 정제가 필요합니다.
・KOD시리즈로 증폭한 PCR 산물에 엑스트라 밴드가 발생하고 있는 경우.
・KOD 시리즈 이외의 프루 프리딩 활성을 가지는 효소로 증폭된 PCR 산물을 사용하는 경우.정제 PCR 산물에 dA 부가를 실시하는 경우는, A-attachment Mix에 첨가하고, dNTP, MgCl 2 , PCR Buffer를 1×농도가 되도록 첨가하여 반응합니다.
※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]
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