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용도
● 실험동물용 유전자 마커 검출
설명
 | 본 제품은 이화학연구소 바이오자원센터에서 개발된 유전자 재조합 계통의 교잡에 의한 의도하지 않은 유전적 오염을 검출하는 방법 . 할 수 있도록 한 키트입니다. |
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특징
● 다양한 샘플을 사용하여 고효율로 트랜스진을 검출할 수 있습니다. 
【표 1 검출 대상 동물 및 사용 가능 샘플】
| 검출 대상 동물 종 | 사용 가능한 샘플 |
| 마우스 | 마우스 꼬리 (꼬리) · 귀 · 배양 세포 |
| 쥐 | 마우스 꼬리 (꼬리) · 귀 · 배양 세포 |
| 인간 | 배양 세포 |
※ 상기 이외의 동물종에서는 내부 표준에 사용하고 있는 트랜스페린 수용체 유전자가 검출되지 않습니다.
마우스, 쥐, 비인간 동물 종의 샘플에서 내부 표준으로 사용되는 트랜스페린
수용체 유전자는 증폭되지 않지만, 기본적으로 표 2에 기재된 유전자를 검출하는 것은 가능하다.
● 9종류의 트랜스진을 동시에 검출할 수 있습니다.
【표 2 검출 대상 유전자】
유전자명 | 약칭 | 비고 | 대상 배열 |
트랜스페린 수용체 유전자 | Tfrc (IC) | 내부 표준 | NM_011638 |
베타갈락토시다아제 유전자 | lacZ | 리포터 유전자 | NC_011750 |
플리파제 유전자 | flp | 재조합 효소 | U46493 |
Cre 재조합 효소 유전자 | cre | 재조합 효소 | NC_005856 |
하이그로마이신 내성 유전자 | hyg | 약물 내성 유전자 | V01499 |
퓨로마이신 내성 유전자 | puro | 약물 내성 유전자 | M25346 |
네오마이신 내성 유전자 | neo | 약물 내성 유전자 | NC_008460 |
GFP (Green fluorescence protein) | GFP | 형광 단백질 | U55763 |
Cas9 (CRISPR associated protein 9) | cas9 | 절단 효소 | 3) |
IRES (Internal Ribosome Entry Site) | IRES | 리보솜 진입 부위 | X74312 |
【표 3 검출되는 변이】
본 키트에서는 다음의 검출 대상 유전자의 변이체도 검출됩니다.
감지된 GFP 변형 | 감지되는 FLP 변형 |
EGFP (Enhanced Green fluorescent protein) | FLPe |
※ 본 키트에서 사용하고 있는 프라이머는 표 2에 기재된 GenBank 등의 배열을 기초로 설계되어 있습니다.
표 3에 나타낸 바와 같이 주요 변형에 대해서는 검출되지만, 부분 배열의 삽입이나 코돈 유세지는
변경되어 있는 경우는 검출할 수 없는 경우도 있습니다. 미리 양해 바랍니다.
원리
실시예
마우스 테일 라이세이트를 이용한 마커 유전자의 검출
표준 프로토콜과 하이 스루풋 프로토콜을 이용하여, 하기 계통의 마우스의 테일 라이세이트를 이용하여 마커 유전자의 검출을 실시했습니다.
【 해석한 마우스의 계통 】
마우스 계통 | 마커 유전자의 유무 |
계통 1 | - |
계통 2 | cre, GFP |
계통 3 | hyg, neo, GFP |
계통 4 | lacZ, neo, IRES |
①표준 프로토콜을 이용한 해석 결과 
② 고 처리량 프로토콜을 이용한 해석 결과 
※내부 표준(IC)으로서 증폭합니다. 마우스, 쥐, 인간의 트랜스페린 수용체 유전자를 증폭하도록 설계되었습니다.
IC의 증폭 크기는 동물 종에 따라 다릅니다. (마우스 1073 bp, 쥐 1071 bp, 인간 1134 bp)
기타 실시예
참고 문헌
1) Nakata H et al., Exp. Anim. , 58 : 437-442 (2009)
2) 요시키 아츠시, 실험 동물 기술 : 49 권 1 호 35-40 (2014)
3) A human codon-optimized SpCas9 Cong L et al., Science , 339 (6121):819-23 (2013)
제품 내용
● Primer and Control template
Primer Set 1 1.2 mL×1개 Primer Set 2 1.2 mL×1개 Control template 100μL×1개
● KOD FX Neo [Code: KFX-201] *
KOD FX Neo 200μL×1개 2×PCR Buffer for KOD FX Neo
1.7mL×3개 2mM dNTPs 1mL×2개
*KOD FX Neo [Code: KFX-201]가 1세트 포함됩니다.
※50μL로 반응을 실시한 경우, 200반응용으로서 사용하실 수 있습니다.
- 주의사항
PCR에는 제품에 첨부되어 있는 dNTPs 또는 별매의 dNTPs Mixture (2mM) [NTP-201]을 사용해 주십시오. 다른 dNTPs에서는 충분한 성능을 얻지 못할 수 있습니다.
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고효율·고성공률 PCR 효소
| 품명 | Code No. | 포장 | 저장 온도 | 설명서 사양 | SDS | 법규제 ※ |
|---|---|---|---|---|---|---|
| 품명 KOD FX Neo | Code No.KFX-201 | 포장 200U×1개(200회용) | 저장 온도 | 설명서 사양
|
SDS
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법규제 ※ -20℃ |
제품 내용
● Primer and Control template
Primer Set 1 1.2 mL×1개 Primer Set 2 1.2 mL×1개 Control template 100μL×1개
● KOD FX Neo [Code: KFX-201] *
KOD FX Neo 200μL×1개 2×PCR Buffer for KOD FX Neo
1.7mL×3개 2mM dNTPs 1mL×2개
*KOD FX Neo [Code: KFX-201]가 1세트 포함됩니다.
※50μL로 반응을 실시한 경우, 200반응용으로서 사용하실 수 있습니다.
- 주의사항
PCR에는 제품에 첨부되어 있는 dNTPs 또는 별매의 dNTPs Mixture (2mM) [NTP-201]을 사용해 주십시오. 다른 dNTPs에서는 충분한 성능을 얻지 못할 수 있습니다.
※ 법규제에 대해서
독독물 및 극물 단속법 [의약용 외독물]
극독물 및 극물 단속법 [의약용 외극물]
위험소방법[위험물]
신구입시에 신청서의 제출이 필요한 제품
없음상기 법령이나 신청서의 제출에 해당하지 않는 제품
국가국민보호법[독소]
세트카르타헤나 법 (유전자 재조합 생물 등의 사용 등의 규제에 의한
생물의 다양성 확보에 관한 법률)
PPRTR법(화학물질 배출 파악 관리 촉진법) [신고 의무 물질]
노동노동안전보건법[통지 또는 표시의무물질]
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