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본 시약은 Taq DNA Polymerase를 포함한 2× 마스터 믹스 (핫 스타트 대응, 전기 영동 색소 포함)입니다.
주형 DNA와 프라이머를 넣는 것만으로 즉시 PCR을 실시할 수 있으며, 반응 용액을 그대로 전기영동 해석에 제공할 수 있습니다.
항 Taq 항체가 마스터 믹스에 미리 혼합되어 있어 핫 스타트 효과에 의해 특이성이 높은 고효율의 증폭을 기대할 수 있습니다.

●2×프리믹스(색소들이)
2 × 마스터 믹스이며, 프라이머를 추가하는 것만으로 편리하게 사용하실 수 있습니다. 색소(BPB)들이이므로, PCR 후에 그대로 겔에 어플라이 가능합니다.

● 뛰어난 PCR 성능 최적화된 버퍼 조성 및 고순도 Taq DNA polymerase의 사용으로 기존의 Taq DNA polymerase에 비해 PCR 성능이 향상되었습니다.

● 핫 스타트 PCR 대응 항 Taq DNA polymerase 항체에 의한 핫 스타트 법을 채용하고 있으며, 높은 감도와 특이성을 나타냅니다.

● 높은 보존 안정성 동결 융해 30회, 4℃ 보존 3개월간에 있어서 안정성을 확인하고 있습니다.

●코스트 퍼포먼스 양호 저렴한 가격대(2.5mL:￥9,800 ー 50μL로 반응을 실시했을 경우, 100회 사용 가능)로 설정되어 있기 때문에, 부담없이 고효율인 PCR을 실시할 수 있습니다.

1. 콜로니 다이렉트 PCR을 이용한 인서트 체크

500bp의 인서트를 갖는 플라스미드 pTA2로 형질전환된 대장균 DH5α의 콜로니를 샘플로서 벡터 상에 설계한 프라이머를 이용하여 PCR을 행하였다.
그 결과 인서트 크기에 따라 명확한 밴드를 얻을 수있었습니다.
본 시약은 콜로니 다이렉트 PCR에서도 힘을 발휘하는 것으로 밝혀졌습니다.

2. 인간 p53 유전자 (2.9 kb)의 증폭

인간 게놈 DNA(50ng)를 주형으로 하여 비교적 증폭이 어려운 것으로 여겨지는 인간 p53 유전자(2.9kb)의 증폭을 실시했습니다.
그 결과 Quick ^Taq® HS DyeMix를 사용하면 가장 효율적이고 특이한 결과를 얻을 수 있었습니다.
또한 핫 스타트 법을 사용하지 않은 경우 (레인 3. 및 4.) 특이성과 감도의 저하가 보인다는 것을 알았습니다 (Quick Taq ^® HS DyeMix는 Hot start 법에 대응하고 있습니다).

3. 다양한 조건에서 증폭 효율 비교

인간 게놈 DNA(50ng) 및 대장균 콜로니를 주형으로 하여 인간 β-globin 유전자(1.3kb, 3.6kb) 및 플라스미드 인서트(3.9kb)의 증폭을 실시하였다.
반응은 각 시약의 최적 조건에 따라 수행되었다.
그 결과 Quick ^Taq® HS DyeMix를 사용하면 고효율, 특이성이 높은 결과를 얻을 수 있었습니다.

기타 실시예
실시예 4: 증폭 산물을 이용한 직접 제한 효소 처리

1) FC Lawyer et al., J. Biol. Chem. , 264 : 6427-6437(1989)
2) DE Kellogg, et al., BioTechniqus , 16 : 1134 (1994)