ImmunoHistoChemistry(IHC)의 버퍼로 사용하는 것 만으로 민감도,와 정확성을 높여 Stain signal을 더욱 선명하게 이미지 구현이 가능하게 합니다.
Can Get Signal® ^immunostain 은 Western Blot이나 ELISA용으로 호평받고 있는 Can Get Signal® ^을 IHC 전용으로 나온 항체 희석 버퍼입니다. 샘플에 따라 Solution A와 B 중 적합 테스트 후 선택하여 사용 가능합니다. (Starter Set;NKB-401) Solution A와 B는 모두 1 차 및 2 차 항체에 사용 가능합니다.

●민감도와 특이성 개선

항원 항체 반응의 높은 특이성을 유지하면서 촉진하는 효과가 있으며, 이전에 비해 noise 없이 결과를 얻을 수 있습니다. 또, 2차 항체의 사용량을 줄임으로써 보다 경제적이고, Background가 없는 선명한 이미지를 얻을 수 있습니다.

●사용하기 쉬운 Ready-to-Use 타입

희석하지 않고 그대로 항체 버퍼로 사용할 수 있습니다.

1. Schneider 2 (S2)의 alpha-tubulin 염색에서 기존 방법과의 비교 실험

2 차 항체는 Alexa Fluor 488로 표지 된 anti-mouse IgG를 사용하여 Drosophila 세포주 (Schneider 2 (S2) 세포)의 alpha-tubulin 염색을 수행했습니다.
그 결과, 이전에는 약간 광범위했던  tubulin signal이, Can Get Signal ^® immunostain을 사용했을 경우에는, 선명하게 검출되어, 세포내의 Background 시그널이 감소하는 경향을 확이하였습니다. 특히 Solution B 을 사용한 결과에서 더욱 선명한 이미지를 구현하였습니다.

2. Glyoblastoma의 Olig2 염색에서 기존 방법과의 비교 검토

인간 및 뇌종양 (Glyoblastoma) [FFPE]에서 Olig2의 염색을 1 % BSA / PBS, Solution A 또는 Solution B로 희석 한 Anti-Human Olig2 Rabbit IgG 및 Alexa 594 goat anti-rabbit IgG(H+L)를 이용하여 검출했습니다.
그 결과, 기존 방법에서는 약한 신호가 Can Get Signal ^® immunostain을 사용하여 향상되었습니다. 특히 Solution A를 사용했을 경우 쪽의 염색이 더 선명하고, background도 억제되고 있는 것처럼 보입니다. 그러나, 비특이적인 반응일 가능성도 생각되었고, 또 관찰하는 데 있어서는 Solution B를 이용한 경우에도 충분히 사용 가능하다고 판단할 수 있었습니다.

3. Glyoblastoma의 CD133 염색에 있어서의 종래법과의 비교 검토

인간 및 뇌종양 (Glyoblastoma) [FFPE]에서 CD133의 염색을 1 % BSA / PBS, Solution A 또는 Solution B로 1/35 희석 한 Rabbit polyclonal to CD133-Stem Cell Marker 및 EnVision (Dako ChemMate)를 사용하여 검출했습니다.
그 결과, 기존 방법에서는 약했던 신호가 Can Get Signal ^® immunostain 을 사용함으로써 증가되었습니다. 단, Solution A를 사용한 경우는 background가 높고, 전체적으로 비슷한 염색이 보였기 때문에 적합하지 않다고 생각되며, Solution B를 사용하여 항체의 희석 배율을 최적화 할 수 있었다.

※그 외의 실시예

실시 예 4 : Swiss 3T3의 Paxillin, p-Tyr, phalloidin에 의한 3 중 형광 염색 (면역 염색)
실시 예 5 : 간암 배양 세포의 FOXO1 염색에서의 종래 방법과의 비교 검토 (면역 염색)
실시 예 6 : Xenopus의 난소 염색에서 종래의 방법과의 비교 연구 (면역 염색)
실시 예 7 : 쥐 경동맥 풍선 주입 모델의 신생 내막에서의 R-Ras 발현 분석의 비교 연구 (면역 염색)
실시 예 8 : 피부 모델에서 PCNA (증식 세포 핵 항원)의 검출 (면역 염색)
실시 예 9 : 소 수정란에서의 열 충격 단백질의 발현 및 국소 분석 (면역 염색)
실시 예 10 : ST2 세포에서 리소좀 마커 LAMP-1의 검출 (면역 염색)

1)K. Moriguchi, et al., Plant Cell. , 17 (2):389-403.(2005)
2) Tokuda M, et al., BIOLOGY OF REPRODUCTION 76 : 130-141. (2007)
3)K. Tamura, et al., The Plant Cell 19 :320-332(2007)
4) H. II, et al., Biological & Pharmaceutical Bulletin 31 (3):363.(2008)
5) K. Tokuhiro, et al., Asian J Androl 10 (5):711-718.(2008)